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A.1 一般规定
本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时,均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的三级水。试验中所用杂质测定用标准溶液、试剂溶液及样品溶液,在没有注明其他要求时,均按GB/T601、GB/T602和GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时,均指水溶液。
A.2 鉴别试验
A.2.1 试剂和材料
A.2.1.1 乙醚。
A.2.1.2 冰乙酸。
A.2.1.3 氢氧化钠溶液:0.05mol/L。
A.2.1.4 盐酸:1mol/L。
A.2.1.5 乙醇:95%。
A.2.1.6 硫酸。
A.2.1.7 硅胶薄层板:称取硅胶10g,加水20mL,置于研钵中研磨成稀稠适宜的浆状液,均匀涂布于玻璃板上,涂层厚为0.5mm。100℃活化30min。
A.2.1.8 展开剂:三氯甲烷:甲醇=99:1。
A.2.2 鉴别方法
A.2.2.1 溶解性
A.2.2.2 颜色反应
A.2.2.2.1 称取0.1g试样,溶于5mL氢氧化钠溶液中,此时呈玫瑰红色,滴加盐酸到酸性后,溶液即由玫瑰红变为亮黄色。
A.2.2.2.2 称取10mg试样,溶于5mL乙醇溶液中,颜色为纯黄色微带绿色荧光,再加少量硫酸就变为玫瑰红色.
A.2.2.3 薄层色谱法
A.2.2.3.1 试样溶液的制备:称取试样0.1g,溶于10mL乙醇溶液中。使用时取上清液。
A.2.2.3.2 点样:在已活化的硅胶板上,用微量注射器吸取2uL试样溶液点样。间距为1.5cm。
A.2.2.3.3 展开与观察:将点好样的薄板放入预先已用展开剂饱和的层析缸中上行法展开(展开时室温为17℃~20℃)。待展开剂前沿达到15cm时,取出,风干。观察应有三个黄色斑点,Rf值分别为0.11~0.12,0.23~0.25,0.41~0.43。
A.3 总姜黄素含量的测定
A.3.1 方法提要
根据姜黄素乙醇溶液在特定波长下的吸光强度计算总姜黄素含量。
A.3.2 试剂和材料
95%乙醇。
A.3.3 仪器和设备
分光光度计。
A.3.4 分析步骤
取约0.1g试样(精确到0.0002g),置于100mL容量瓶,加入95%乙醇,振荡溶解摇匀。用95%乙醇定容混合。移取1.0mL溶液到250mL容量瓶,用95%乙醇定容。用1cm比色皿,测定425nm下的吸光度。
A.3.5 结果计算
总姜黄素含量的质量分数w1,按式(A.1)计算:
式中:
A——试样的吸光度;
250——体积换算系数;
100——容量换算系数;
m——试样的质量,单位为克(g);
1607——425nm处,姜黄素标品乙醇溶液的特定吸收系数。
文章来源:《食品安全国家标准汇编食品添加剂(五)》
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