A.4 酸不溶物的测定

A.4.1 试剂和材料

硫酸溶液：94.5%～95.5%。加一定量已知浓度的硫酸于足够的水中，使最终浓度在上述范围。

A.4.2 分析步骤

称取2g试样，精确到0.001g，置于250mL烧杯中，加150mL水，1.5mL硫酸溶液。用表面皿盖住烧杯，置于蒸汽浴上加热6h，用带有橡胶头的搅拌棒经常用力擦遍烧杯内壁，并补充由蒸发所损失的水。称取适宜的酸助滤剂500mg，置于该试样溶液中，用预先在105℃±2℃干燥1h的已知重量且装有石棉垫的布氏坩埚进行过滤。用热水洗涤滤渣数次，将坩埚连同内容物在105℃±2℃干燥3h，在干燥器中冷却后称量。总质量与助滤剂加坩埚和石棉垫的质量之差，即为酸不溶物的量。换算成质量分数。

A.5 蛋白质的测定

A.5.1 方法原理

采用凯氏定氮法测定混合物中总氮量。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化试样将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出试样中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量。

A.5.2 试剂和材料

A.5.2.1 硫酸钾.

A.5.2.2 硫酸铜。

A.5.2.3 锌粒。

A.5.2.4 硫酸。

A.5.2.5 氢氧化钠溶液：400g/L。

A.5.2.6 硼酸溶液：40g/L。

A.5.2.7 甲基红-亚甲基蓝指示液。

A.5.2.8 硫酸标准滴定溶液：c(H₂SO₄)=0.5mol/L。

A.5.3 仪器和设备

凯氏仪：由500mL凯氏烧瓶和蒸馏装置组成。

A.5.4 分析步骤

称取1g试样，精确到0.001g，放入500mL凯氏烧瓶中，加入10g硫酸钾、500mg硫酸铜和20mL硫酸，缓慢加热，加热过程中若有泡沫产生，可使烧瓶倾斜45°，以利于泡沫消去。煮解至溶液为澄清的绿色或几乎无色且能保持至少30min，冷却，加入150mL水混匀，继续冷却。小心将100mL氢氧化钠溶液倾入烧瓶底部，在酸溶液的下面形成单独的一层。加入适量的锌粒。立即将烧瓶接上蒸馏装置，按一般定氮法蒸馏，将镏出液收集于盛有50mL硼酸溶液的500mL接收瓶中。蒸馏过程中轻轻摇动烧瓶，使内容物混合均匀，待2/3的液体被收集到接收瓶后，停止蒸馏。向接收瓶中加甲基红-亚甲基蓝指示液数滴，用硫酸标准滴定溶液滴定。

同时用2g蔗糖按上述操作进行空白试验。

A.5.5 结果计算

蛋白质的质量分数w₂，按式(A.2)计算：

式中：

5.7——蛋白质含量与氮含量的换算系数；

V——消耗的硫酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；

1000——体积单位换算系数；

c——硫酸标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；

M——氮的摩尔质量，单位为克每摩尔(g/mol)，[M=70.03]；

m₃——试样的质量，单位为克(g)。

A.6 淀粉试验

A.6.1 试剂和材料

碘溶液：称取碘14g，溶于含有36g碘化钾的100mL水中，加3滴盐酸，用水稀释至1000mL，混匀。

A.6.2 分析步骤

取适量试样与水按1：10的比例配制试样溶液，加入几滴碘溶液。试样溶液应不显蓝色。

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文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(五)》

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