九、复方木鸡颗粒中苦参碱含量测定的分析方法验证实例

(一) 线性关系考察

精密称取苦参碱对照品10.80mg，置50ml容量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，量取1ml、2.5ml、5ml、7.5ml、10ml，分别置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。进样10ul，测定。以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，进行线性回归，回归方程：Y=887 050X-12674；Y=0.9995。表明苦参碱在0.216～2.16ug范围内线性关系良好，见表11-4。

表11-4 线性关系考察

(二) 重复性试验

精密称取同一样品(批号为051202)6份，每份约0.5g，按供试品溶液的制备方法制得供试品溶液.照色谱条件测定峰面积。结果平均含量为1.705mg/g。RSD为0.89%(n=6)，见表11-5。

表11-5 重复性(n=6)

(三) 加样回收试验精密量取苦参碱对照品甲醇溶液(0.2142mg/ml)1ml、2ml、3ml各3份(低、中、高浓度)，置三尧瓶中，回收溶剂至干，精密称取已知含量的样品(批号051202)约0.25g(共9份)，分别置上角烧瓶中，加浓氨试液1ml和三氯甲烷25ml，按供试品溶液的制备方法制得溶液，按色谱定峰面积值，外标法计算。测得平均回收率102.46%，RSD为1.88%(n=9)，见表11-6。

表11-6 加样回收试验

(四) 范围

精密量取苦参碱对照品甲醇溶液(0.216mg/ml)1ml、3ml各3份，同回收率试验方法进行试验，将试验结果与回收率试验项下的加入对照品溶液1ml、3ml(低、高浓度)各6份的结果计算重复性，低浓度的平均回收率为105.74%，RSD为2.36%(n=6)；高浓度的平均回收率为102.37%，RSD为1.22%(n=6)，见表11-7和表11-8。

表11-7 低浓度范围(50%)(n=6)

表11-8 高浓度范围(150%)(n=6)

(五) 空白对照试验(专属性试验)

取菟丝子、核桃楸皮适量，加水煎煮，滤过，滤液浓缩成稠膏状(约得稠膏5.5g)，加云芝提取物6.6g，拌匀，取0.5g，按供试品溶液的制备方法制得空白溶液，照色谱条件测定，结果在与苦参碱对照品保留时间相应的位置无色谱峰出现，表明处方中其他药味对测定无干扰(图11-1)。

图11-1 HPLC色谱图

(六) 耐用性

1. 稳定性试验取同一份供试品溶液(样品0203-1)，自配制后分别在0、1、4、8、12、24h测定峰面积，RSD为0.94%(n=6)，说明供试品溶液在配制后24h内稳定，见表11-9。

表11-9 稳定性试验结果(n=6)

2. 不同色谱柱比较取同一样品，分别采用三种不同型号的色谱柱测定含量，结果平均含量1.61mg/g，RSD为1.57%(n=6)，见表11-10。

表11-10 不同色谱柱测定结果

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文章来源：《实用中药药品检验检测技术指南》

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