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[检测原理]
胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可 判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药。
本标准规定由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快 速检验方法。适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选 测定。
[仪器]
常量天平;
农药残留速测仪[(37 ±2)℃恒温装置];
超声波提取器;
速测卡(固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片)。
[操作步骤]
(1)试剂配制 PH为7. 5的缓冲溶液:分别取15.0g磷酸氢二钠与1.59g无水磷酸二氢钾,用500mL蒸馏水溶解。
(2)检测方法
整体测定法:
①选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土 ,剪成1cm左右见方碎片,取5g放 入带盖瓶中,加入10mL缓冲溶液,振摇50次,静置2min以上。
②取一片速测卡,用白色药片蘸取提取液,放置10min以上进行预反应,有条 件时在37℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。
③将药片放在农残检测仪上,38℃恒温反应10min,预反应后的药片表面必须保持湿润。
④盖上盖,38℃恒温3min,使红色药片与白色药片叠合反应。
表面测定法(粗筛法):
①擦去蔬菜表面泥土,滴2~3滴缓冲溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液 处轻轻摩擦。
②取一片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
③将药片放在农残检测仪上,38℃恒温反应10min,预反应后的药片表面必须 保持湿润。
④盖上盖,38℃恒温3min,使红色药片与白色药片叠合反应。
[结果判定(与空白对照卡比较)]
白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。
白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果。
对阳性结果的样品,可用其他分析方法进一步确定具体农药品种和含量。
[仪器测定法]
将速测卡插入仪器中,将提取液2~3滴滴于速测卡白色药片上,同时做一片 空白实验,启动仪器自动运行预反应10min,盖上仪器盖,3min时仪器报警,打开仪 器观察结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果。白色药片 略有浅蓝色为弱阳性,白色药片不变色为强阳性。
[农药中毒残留物的参考定性]
取可疑中毒残留物适量,加2倍量的浸提液,过滤或离心机分离,取清液测定。 如用有机溶剂(如丙酮等)提取残留物,必须将有机溶剂挥发干后再用浸提液溶解 残渣后测定。有机溶剂对测定有一定干扰。
[注意事项]
(1)样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性;
(2)红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为准;
(3)如果蔬菜在种植过程中使用了超标的混配农药,在检测中发现的有机磷 和氨基甲酸酯类农药残留超标并不代表其中每一种农药均超标,有可能每一种农 药均不超标而只是各种农药累加后超标。
文章来源:《食品快速检测实训教程》
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