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瘦肉精的快速检测(免疫胶体金法)

发布时间:2020-11-24 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:3241

克伦特罗学名盐酸克伦特罗(CIenbUterol HydrochIoride),俗称瘦肉精,是一种 β-肾上腺受体激动剂,在临床上用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎和肺气肿等疾病。

因该药可以提高瘦肉率,减少脂肪沉积和促进动物生长,被一些畜牧养殖企业 作为养殖促进剂使用。作为饲料添加剂,克伦特罗的用量远超过临床用药剂量的 5~10倍,人食用了饲喂克伦特罗作为添加剂的动物所生产的禽畜产品后,残留的克伦特罗可引起食物中毒,通常会出现肌肉震颤、心悸、精神紧张、头疼、肌肉疼痛、 晕眩、恶心、呕吐、发热、战栗等症状,严重者可引起死亡,对消费者健康构成极大危害。世界多个国家都有食用克伦特罗残留的食物导致食物中毒的案例发生,因此 许多国家禁止在饲料中添加克伦特罗来增加动物的瘦肉率。

[检测原理]

克伦特罗快速检测试剂板的中央膜面上固定有两条隐形线,克伦特罗抗原固 定在测试区作为检测线(T线),二抗固定在质控区作为对照线(C线)。

当待检样品溶液滴入试剂板加样孔后,样品溶液因层析作用往上扩散。如果 样品溶液含有相应药物的残留,药物将和胶体金颗粒上的抗体先行反应,因此当胶 体金颗粒随样品溶液扩散至T线时,胶体金颗粒上抗体的活性位点将因被样品溶 液中的药物占据而无法与T线上药物抗原结合;所以当样品中的克伦特罗含量达 1μg∕kg以上,试剂板上的T线将较C线显色浅或甚至无显色,判定为阳性。反之, 当样品中克伦特罗含量在1μg∕kg以下或无残留时,试剂板上的T线显色与C线相 近或偏深,判定为阴性。

[仪器及试剂]

(1)盐酸克伦特罗免疫胶体金快速检测试剂板(40条/盒)

(2)吸管(1个/袋)。

(3)干燥剂(1片/袋)。

(4)PBST缓冲液(1瓶/盒)。

[操作过程]

(1)于5mL离心管中加入5g左右剪碎或是高速匀浆过的猪肉组织样,盖紧管盖。

(2)将装有样品的离心管在90℃以上水浴锅中加热10min。

(3)加热完成后取出冷却至室温,可以明显看到底部有溶液渗出。

(4)吸取3滴(约100uL)煮出的样品渗出液到1.5mL的离心管中。

(5)吸取3滴(约100uL)盐酸克伦特罗组织样专用稀释液到1.5mL离心管 中,充分混合均匀。

(6)从包装铝箔袋中取出检测卡平放。吸取3滴(约100mL)混匀溶液加入到 试剂板加样孔中。

(7)样液滴入加样孔后开始计时,5 ~ 10min判定结果。

[结果判断]

如图5 -2所示。

图5-2盐酸克伦特罗快速检测结果判断

(1)阴性(-)T线(测试线,靠近加样孔一端)比C线(对照线)深或一样深, 表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于1μg∕kg或不含盐酸克伦特罗残留。

(2)阳性(+ ) T线比C线浅,或T线无显色,表示样品中盐酸克伦特罗浓度 高于1μg∕kg;T线相比C线越浅,表示样品中盐酸克伦特罗浓度越高。

(3)无效 未出现C线,表明操作过程不正确或试剂板已变质失效。在此情 况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的试剂板重新测试。

[注意事项]

(1)从原包装袋中取出的试剂板,打开后务必在1h内尽快地使用。

(2)尽量不要触摸试剂板中央的白色膜面。

(3)请勿使用过期的试剂板。

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文章来源:《食品快速检测实训教程》

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