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将DNA导入真核细胞的方式有两种:瞬时转染与稳定转染。稳定转染是用于建立克隆的细胞系,这种细胞系中转染的目的基因整合到染色体DNA中并指导适量目的蛋白的合成。在此我们主要介绍瞬时转染。
在瞬时转染中,重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时高水平的表达。转染的DNA不必整合进宿主染色体,当有大量样品需要在短时间内分析时,尤其是在转染后1到4天内收获细胞,所得溶解产物用于检测目的基因的表达时,可以采用瞬时转染的方式。
将基因导入真核细胞的方法有许多种。这些技术可以归纳成3类:生化方法转染、物理方法转染,以及病毒介导的转染。到目前为止,将克隆DNA导人真核培养细胞中,主要采用生化方法。
因此,本章主要阐述前两类,即生化方法和物理方法。具体选择哪种转染方法要根据实验目的来决定,如用于筛选的检测方法,细胞系在转染压力下的生存能力及系统所需要的效率等。
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