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放线菌是介于细菌与真菌之间的一类微生物,其菌体为丝状体,伸人培养基内的为基内菌丝,也称营养菌丝,生长在培养基表面的为气生菌丝。气生菌丝的上面可分化形成孢子丝,有各种形状,如直立、波浪、螺旋等。孢子丝可进一步分化形成孢子,孢子的形状大小也不相同,是分类的重要依据。
放线菌的菌落早期和细菌菌落相似,后期形成抱子菌落呈粉状、干燥,有各种颜色,呈同心圆放射状。
1.实验材料
显微镜、载玻片、酒精灯、接种环、石炭酸复红、解剖刀、盖玻片、培养皿、高氏1号合成培养基、丰加链霉菌(Streptomycestoyocaensis)及菌落。
2.方法与步骤
(1)水浸片法的制作及观察取洁净载玻片,滴加无菌水一滴。用接种环挑取经过28-30℃培养4-5d的放线菌菌落少许,置于载玻片的无菌水滴内。取洁净盖玻片一块,先将盖玻片一端与液滴接触,然后将整个玻片慢慢放下避免产生气泡。置于显微镜下用高倍镜观察。
(2)印片法的制作及观察该方法的优点是不打乱抱子的排列状态。
①取菌:取片干净的载玻片,用解剖刀切取一个完整的放线菌菌落(带培养基切下),放在一载玻片的中央(注意菌落应正放)。然后将另一载玻片在酒精灯下微微加热后,盖在这一菌落上面,用接种环或解剖刀轻轻按压,然后小心拿下上面这块玻片(不可在菌落上移动)。
②固定:将取下的玻片,通过火焰固定。
③染色:用石炭酸复红染色30s,然后水洗,风干。
④镜检。
(3)埋片法的制作及观察将培养基融化后倒人平板,待凝固后挑取少量放线菌抱子接入培养基上,在接种线旁倾斜插人无菌盖玻片。28.30℃培养4-5d后,菌丝沿玻片向上生长,待菌丝长好后,取出玻片放在一干净载玻片上,置于显微镜下观察。
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