合成培养基（synthetic media）是根据研究和了解细胞所需成分的基础上配制而成的，内含碳水化合物、氨基酸、脂类、无机盐、维生素、微量元素和细胞生长因子等，目前常用的合成培养基主要是MEM,Eagle培养液、RPMI 1640培养液、199培养液和F12等，主要合成培养基的成分组成见表1-6，现已成为普遍应用的商品化的培养基。但合成培养基尚未成为十分完全的培养基，单独使用时虽有细胞的生存，但不能很好的生长增殖，它只能维持细胞不死，但不能促进细胞增殖生长，使用时尚需添加天然培养基。

l. Eagle培养液 目前常用的是后来设计的低限量Eagle培养基（minimum Eagle medium, MEM )，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酞胺和8种维生素，成分简单，广泛适合各种已建成细胞系的培养，同时宜于添加或减少某些成分，也特别适于特殊研究的细胞培养工作。在它的基础上开发的基础Eagle培养基（basal medium Eagle, BME）和Dulbecco改良的Eagle培养基（Dulbecco's modified Eagle medium, DMEM )，应用也十分广泛。BME删去了一部分必需氨基酸，增添了一些非必需氨基酸，它在培养中要求隔天更换培养液一次，保证了细胞透亮，易于观察。DMEM增加了各成分的用量（加倍），葡萄糖用量可选择低糖(1000mg/L)或高糖（4500mg/L)，对于生长速度较快、附着性较差的肿瘤细胞生长有利。特别应用在附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养时，采用高糖的培养液效果较好。所以常用于杂交瘤技术中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。

(1) BME配法：取一袋BME粉剂型培养基（美国产9.2g/袋）溶于950m1三蒸水中，加0.35g NaHC0₃,溶解后定容1000m1，用1 mol/L NaOH或HCl调pH至6.8～7.0,滤过除菌（pH升至7.0～7.2)，分装后于4℃（短期）或-20℃（长期）保存。

(2) MEM配法：称取9.4g MEM粉末（日本Nissui制药有限公司）溶于950m1三蒸水中，并加入谷氨酞胺0.2928，溶解后定容1OOOml,滤过除菌，分装并于低温保存。用时用7.5% NaHC0₃调pH至7.0～7.2（封闭式培养加7.5% NaHC0₃ 2.9m/200m1，开放式培养加5.8 ml/200m1)。如为其他公司产品，可参照说明书进行配制。

2. RPMI1640RPMI1640也是一种常用的培养液，最初是针对淋巴细胞的培养而设计的，问世后发现能广泛适应许多种类的细胞，包括正常细胞和肿瘤细胞的培养，而且成分简单，和MEM一样应用十分广泛。

配制方法：取一袋RPMI 1640（日本产10.4g/袋，德国产10.5g/袋）粉剂溶于950m1三蒸水中，加2.Og NaHC0₃，充分搅拌使完全溶解，用三蒸水定容至l000ml，用1 mol/L NaOH或HCl调pH至6.8～7.0，滤过除菌（pH升至7.0～7.2)，分装后于4℃或-20℃保存备用。

3. 199培养液第一个合成培养基199于1950年问世，它含69种成分，几乎包括了所有的氨基酸、维生素和一些核酸衍生物、生长激素、脂类，加上硝酸铁和Earle生理盐水，这个较为复杂的合成培养液仅能短时间维持各类细胞的生长，只有加了血清之后才能作为生长培养基。199成分复杂，最近已不大使用。

配制方法：称取199培养基粉末旧本产）10.5g溶于三蒸水1000m1中滤过除菌后，分装，置49C（短期）或一20℃（长期）保存。