人和动物的组织细胞绝大部分都可以在体外进行培养，但其难易程度与组织类型、分化程度、供体的年龄、原代培养方法等有直接关系。原代培养取材是进行组织细胞培养的第一步。取材的组织最好尽快培养，而且一定要严格地无菌操作。

【材料】

1．无菌眼科组织剪、镊子、手术刀等手术器材；

2．装有无血清培养基或Hanks液的小瓶；

3．小烧杯（10ml,50ml)，无菌离心管和培养皿，长号针头注射器等。

【方法】

1．皮肤和黏膜的取材皮肤和黏膜是上皮细胞培养的重要组织来源，多来自手术过程中切除部分的组织，动物的皮肤和黏膜组织需单独取材。

(1)术前皮肤准备，皮肤与黏膜用75％乙醇消毒（注意不要用碘酒消毒），取皮方法类似外科取断层皮片，面积在2～3 mm²即可，这样局部取材可不留瘢痕。

(2)动物的皮肤与黏膜取材需剃毛，先后用3％碘酊和75％乙醇消毒，再用手术刀或剪刀取下所要的皮肤和黏膜；因以获取上皮细胞为目的，无论用何种方法取材都不要切取太厚皮肤，而且要尽可能去除所携带的皮下或黏膜下组织；如欲培养成纤维细胞则相反，因皮肤、黏膜表面带有大量细菌和真菌等，取材时要严格消毒。

(3)将装盛组织材料的容器先倒入无血清培养基或Hanks液备用，无菌切取的组织放在无菌小烧杯或培养皿的液体内，如遇到所取组织有被污染的可能时，必要时可用较高浓度的抗生素和抗真菌制剂加到液体内漂洗与浸泡。

2．内脏和实体瘤的取材人和动物体内各脏器及其体内所发生的肿瘤是较常用的培养材料。内脏除消化道外基本是无菌的，但有些实体瘤的核心部位有坏死并向外破溃，有可能被细菌感染。在内脏和实体瘤取材时，一定要明确和熟悉自己所需组织类型和部位，要仔细剪除不需要的部位，如血管、淋巴、神经和组织间的结缔组织；在取肿瘤组织时，要尽可能在肿瘤细胞分布较多的部位，避开坏死液化部位。

(1)人体内脏和实体瘤的取材一般是依赖外科手术时完成的。动物取材时要选用胚胎或成体小动物，选用适当的处死动物的方法（如引颈法、窒息法或麻醉法）。将刚处死的小动物整个浸入盛有0.3％苯扎溴铵或75％乙醇的烧杯中5分钟，注意时间不能太长以免消毒液从口和其他孔径进入体内，影响组织活力。不能用浸泡消毒法的较大动物，也可在较大范围的区域剃毛，然后用75％乙醇局部消毒。

(2）动物消毒后的操作最好在超净台内进行。将动物用消毒过的大头针固定在无菌的蜡质板或小木板上，用眼科剪和止血钳剪开皮肤，解剖胸腔或腹腔，按部位剪下所需要的脏器或肿瘤组织。取材中要按解剖层次更换剪刀，绝不能用一把剪刀从皮肤剪到所需脏器。

(3)取好的组织要放置在另一个无菌的平皿内，倒入少许无血清培养液或Hanks液，接下去进行原代培养的操作。

3．体液中悬浮细胞的取材体液（body fluid）包括血液、脑脊髓液、骨髓、精液、胸腔积液、腹水、羊水、阴道分泌液等。血液中的淋巴细胞和粒细胞是常用的培养材料，多用于淋巴细胞免疫功能的研究和应用，以及血细胞染色体的分析等。
(1)血液取材一般多采用静脉取血，采血时要严格无菌。为防止凝血常用肝素抗凝剂，用量以产生抗凝效果的最小量为宜，用量过大会导致溶血。肝素的常用浓度为20U/ml，抽血前针管内要用浓度较高的肝素（500U/ml）湿润。

(2）其他体液（如脑脊髓液、骨髓、胸腔积液、腹水、羊水等）的取材，一般使用长号码的无菌注射器直接插入相应部位的体腔内抽取，取出后立即注入无菌离心管内，采用离心法分离。一般用500～1000r/min的低转速离心，离心后最好立即培养。血液和其他体液悬浮细胞不宜低温保存。