移植块培养（explant culture）是从活体内取出组织小块的培养，这是一项组织培养的早期技术。移植块成活，细胞生长从组织块中游出伸长等，可作为生理活性物质的生物鉴定指标。当培养未分化的组织块时，可认为在培养体内的组织分化，也可用作小型器官的培养法。近年来，人及动物成体组织块的长期培养法被广泛应用。

【材料】

1．组织来源孵育9～11日龄鸡胚1个。

2.培养液MEM+20％小牛血清（CS) ,CS，无钙镁Hanks液（CMF-Hanks)。

3．器具各种吸管、弯头吸管，60mm培养平皿或25cm²培养瓶，90mm玻璃平皿，60mm玻璃平皿，镊子、眼科剪，吸管架，鸡卵架等。

【方法】

1．鸡胚摘出 取9～11日龄鸡胚于蛋架上，用碘酊、乙醇消毒鸡胚气室侧，用尖剪从气室部切入，剪除气室部蛋壳，用镊子摘除卵壳膜，轻轻夹住鸡胚颈部取出鸡胚于无菌90mm平皿内，注意不要强拉鸡胚颈部。

2．制备心脏块用镊子固定住鸡胚，从腹部向胸部切开，用镊子摘出心脏，移入装有10m1 CMF-Hanks液的60mm平皿内，用刀将心房和血管等切除，心室放CMF-Hanks液中充分洗涤，然后将心室移入另一装有CMF-Hanks液的平皿内，用刀将心室切成适当大小（1～2mm³）小块，于CMF-Hanks液中洗涤数次，转入装有lml CS的平皿中暂存。

3．培养与观察用镊子夹住组织块放在刀的前端，放入60mm塑料培养皿（或25cm²培养瓶）中，等距间隔并列10个接种点，组织片放置的周围有CS顺平皿底倾流，用弯头吸管吸干CS，置37℃ ,5% C0₂孵箱孵育30分钟，待组织片完全贴附于平皿或瓶底时，缓缓加入培养基2ml;湿满整个平皿或瓶底，培养1天后追加培养基2m1，继续培养。

【结果】

心肌细胞培养24小时后大部分已贴壁生长，细胞形态开始呈圆形，贴壁生长的细胞多呈梭形或不规则的星形。单个细胞可出现收缩搏动。培养至4～6天后，于相差显微镜下可见细胞形成单层或细胞簇，成簇的心肌细胞呈放射状排列，呈现节律性收缩现象。

【注意事项】

在将组织片放置于用CS铺底的平皿或瓶底后，要用弯头吸管吸净多余的CS，待组织片完全贴附时（约30分钟），需缓慢加入培养基，小心将尚未贴壁牢靠的组织块冲起来。