1 范围

本标准规定了动物源性食品中地塞米松、倍他米松、氟经泼尼松龙和双氟美松残留量的酶联免疫测定方法。

本标准适用于肉类组织、水产品、牛奶和奶粉中地塞米松、倍他米松、氟羟泼尼松龙和双氟美松残留量的测定。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 6379测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重现性和再现性

GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法

3 试样的制备和保存

3.1 试样制备

对组织样品：从全部样品中取有代表性样品，混匀，用四分法缩分出不小于1000g试样，去除脂肪、充分绞碎、混均、分装、密封，并加以标识。

对牛奶和奶粉：从原始包装中取有代表性样品，充分混匀，用四分法缩分出不小于500 g试样，装入清洁密闭容器，加封后标明标识。

3.2 试样保存

将样品于-20℃～-18℃条件下保存。

4 方法提要

以乙腈、偏磷酸、正己烷和二氯甲烷的三相液液萃取系统来提取组织中残留的地塞米松、培他米松和氟羟泼尼松龙等。处理后样品中残留的激素与酶标记地塞米松共同竞争结合地塞米松抗体，同时地塞米松抗体结合至包被有绵羊抗兔IgG的抗体的微孔板上，通过洗涤除去末结合的残留物和酶标记地塞米松，然后加．入底物显色，用酶标仪测定吸光度，吸光度值与待测物浓度成反比，根据吸光度值得出试样中残留物的含量。

5 材料和试剂

除另外说明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

5.1 地塞米松检测试剂盒。

5.2 偏磷酸。

5.3 乙腈。

5.4 正己烷。

5.5 二氯甲烷。

5.6 0.1％偏磷酸：称取1g偏磷酸(5.2)用水定容至1 L。

5.7 地塞米松、倍他米松、氟羟泼尼松龙和双氟美松标准品：纯度均≥98％。

5.8 地塞米松、倍他米松、氟羟泼尼松龙和双氟美松标准品溶液的配制：分别用乙醇作为溶剂配制成100 mg/L的储存液，于4℃～8℃条件下保存。

6 仪器

6.1 酶标仪。

6.2 8道移液器：10uL～100uL。

6.3 单道移液器：10uL～100uL，20uL～200uL，100uL～1000uL和2mL～10 mL。

6.4 混合振荡器。

6.5 离心机。

6.6 氮吹仪。

6.7 具塞试管：15 mL。

7 分析步骤

7.1 提取

称取2.0g样品，置于15uL，具塞试管中，加入4 uL浓度为0.1％的偏磷酸(5.6)，充分混匀后加入4 mL乙腈(5.3)，振荡20 min, 3000r/min离心10 min，取4 mL上清液于一干净试管，加入2 uL正己烷(5.4)和二氯甲烷(5.5)混合液(4+1)，混合后静置分层(若浑浊，可3000r/min离心5 min)。吸取1 mL中间层(乙腈和二氯甲烷混合层)于一干净试管，氮气吹干，用样品稀释液定容至0.4 mL即可供ELISA检测用。最后稀释倍数为1。

7.2 测定条件

7.2.1 操作条件

所有操作应在室温下(20℃～24℃)进行，地塞米松试剂盒中所有试剂的温度均应回升至室温(20℃～24℃)后方可使用。

7.2.2 洗板条件

7.2.2.1 人工洗涤次数四次以上，每次注入洗涤缓冲液量为300uL。

7.2.2.2 自动洗板可以预定四次。

7.2.3 酶标仪测定条件

酶标仪测定波长为450 nm。

相关链接：水产品中氯霉素残留检测方法（二）

文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。