5 试样制备与保存

5.1 牛肉、猪肝、兔肝

从原始样品取出有代表性样品约500 g，用组织捣碎机充分捣碎混匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样置于-18℃冷冻避光保存。

5.2 牛奶

从原始样品取出有代表性样品约500 g，充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样置于0℃～4℃冷藏避光保存。

5.3 鸡蛋

从原始样品取出有代表性样品约500 g，去壳后用组织捣碎机搅拌充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样置于0℃～4℃冷藏避光保存。

在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。

6 测定步骤

6.1 提取和净化

称取约5g试样(精确至0.01g)于50 mL离心管中，加入适量无水硫酸钠(3.6)，再加入20 mL乙腈，用均质器以10000 r/min均质2 min，再用振荡器振摇提取20 min后，10000 r/min离心20 min，收集上清液于125 mL分液漏斗中。残渣用20 mL乙腈再提取一次。合并上清液，加入20 mL乙腈饱和后的正己烷(3.7)，振荡5 min，静置20 min，收集下层液体。40℃水浴中减压浓缩至近干，残留物依次用0.5 mL乙腈、0.5 mL和1.0mL 0.1％甲酸水溶液(含0.5 mmol/L 乙酸铵)(3.8)溶解，超声波水浴助溶30 s后，转移至10 mL刻度试管，用0.1％甲酸水溶液(含0.5 mmol/L 乙酸铵)定容到2 mL，再加入2 mL 乙腈饱和后的正己烷混匀30 s后静置，取下层液体，10000r/min离心后过0.2 um微孔滤膜(3.14)，待测定。

6.2 基质混合标准溶液的制备

称取5份约5g阴性试样(精确至0.01g)于50 mL离心管中，按照标准曲线最终定容浓度分别加入中间标准溶液(3.42)或混合标准工作溶液(3.13)，余下操作同6.1。

6.3 测定

6.3.1 液相色谱条件

6.3.1.1 色谱柱：Acquity UPLC TM BEH C₁₈，2.1 mm×50 mm(内径),1.7 um，或相当者。

6.3.1.2 流动相及洗脱条件(梯度为线性变化)见表1。

6.3.1.3 柱温：30℃。

6.3.1.4 流速：0.2mL/min。

6.3.1.5 进样量：10 uL。

6.3.2 质谱条件

其中氮气和氢气纯度均大于等于99.999％。

表1 液相色谱洗脱条件

6.3.3 色谱测定

根据样液中待测物的含量，选定浓度相近的混合基质标准溶液，待测样液中非m体类抗炎药的响应值应在仪器检测的线性范围内。对混合基质标准溶液及样液(6.1)等体积参插进样测定。

6.3.4 定性测定

按照上述条件测定样品和混合基质标准工作液，如果检测的质量色谱峰保留时间与混合基质标准工作液一致，允许偏差小于±2.5 %；定性离子对的相对丰度与浓度相当混合基质标准工作液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表2的规定，则可判断样品中存在相应的被测物。

表2 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差

6.4 空白试验

除不加试样外，按上述测定步骤进行。

相关链接：进出口动物源性食品中非甾体类抗炎药残留量检测方法（一）

文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。