1 范围

本标准规定了婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定方法。

本标准适用于婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定。

2 规范性引用文件

本标准中引用的文件对于本称准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。

3 原理

试样中的乳糖、蔗糖经提取后，利用高效液相色谱柱分离，用示差折光检测器或蒸发光散射检测器检测，外标法进行定量。

4 试剂和材料

除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1 乙腈

4.2 乙腈：色谱纯。

4.3 标准溶液

4.3.1 乳糖标准贮备液(20mg/mL)：称取在94℃±2℃烘箱中干燥2h的乳糖标样2g(精确至0.1mg),溶于水中，用水稀释至100mL容量瓶中。放置4℃冰箱中。

4.3.2 乳糖标准工作液：分别吸取乳糖标准贮备液(4.3.1)0mL,1mL,2mL,3mL,4mL,5mL于10mL容量瓶中，用乙腈(4.1)定容至刻度。配成乳糖标准系列工作液，浓度分别为0mg/mL,2mg/mL,4mg/mL,6mg/mL,8mg/mL,10mg/mL。

4.3.3 蔗糖标准溶液(10mg/mL)：称取在105℃±2℃烘箱中干燥2h的蔗糖标样1g(精确到0.1mg),溶于水中，用水稀释至100mL容量瓶中。放置4℃冰箱中。

4.3.4 蔗糖标准工作液：分别吸取蔗糖标准溶液(4.3.3)0mL,1mL,2mL,3mL,4mL,5mL于10mL容量瓶中，用乙腈(4.1)定容至刻度。配成蔗糖标准系列工作液，浓度分别为0mg/mL,1mg/mL,2mg/mL,3mg/mL,4mg/mL,5mg/mL。

5 仪器和设备

5.1 天平：感量为0.1mg。

5.2 高效液相色谱仪，带示差折光检测器或蒸发光散射检测器。

5.3 超声波振荡器。

6 分析步骤

6.1 试样处理

称取固态试样1g或液态试样称取2.5g(精确到0.1mg)于50mL容量瓶中，加15mL 50℃～60℃水溶解，于超声波振荡器中振荡10min,用乙腈(4.1)定容至刻度，静置数分钟，过滤。取5.0mL过滤液于10mL容量瓶中，用乙腈(4.1)定容，通过0.45um滤膜过滤，滤液供色谱分析。可根据具体试样进行稀释。

6.2 测定

6.2.1 参考色谱条件

色谱柱：氨基柱4.6mm×250mm,5um,或具有同等性能的色谱柱；

流动相：乙腈(4.2)—水=70+30；

流速：1mL/min；

柱温：35℃；

进样量：10uL；

示差折光检测器条件：温度33℃～37℃；

蒸发光散射检测器条件：飘移管温度：85℃～90℃；气流量：2.5L/min；撞击器：关。

6.2.2 标准曲线的制作

将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的峰面积或峰高，以峰面积或峰高为纵坐标，以标准工作液的浓度为横坐标绘制标准曲线。

6.2.3 试样溶液的测定

将试样溶液(6.1)注入高效液相色谱仪中，测定峰面积或峰高，从标准曲线中查得试样溶液中糖的浓度。

7 分析结果的表述

试样中糖的含量按式(1)计算：

式中：

X—试样中糖的含量，单位为克每百克(g/100g)；

c—液中糖的浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)；

V—试样定容体积，单位为毫升(mL);

n—样液稀释倍数；

m—试样的质量，单位为克(g)。

以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。

8 精密度

在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（一）》

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