6 分析步骤

6.1 试样的处理

称取5g～10g（精确至0.01g）试样（如有必要，将试样放入捣碎机中捣碎；试样中含维生素B2 5ug以上）于100mL三角瓶中，加60mL 0.1mol/L盐酸（4.7）,充分摇匀，用棉花塞和牛皮纸封口，放入高压灭菌锅内，在121℃下保持30min,待冷却至40℃以下后取出，轻摇数次；用2.0mol/L乙酸钠溶液（4.10）调pH值至4.0左右，加入2.0 mL混合酶溶液（4.11）,摇匀后，置于37℃培养箱中过夜；将酶解液转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，用定量滤纸过滤，取滤液再经0.45um滤膜（5.5）过滤， 取滤液备用。

注：操作过程应避免强光照射。

6.2 测定

6.2.1 参考色谱条件

色谱柱：C₁₈反相色谱柱（粒径5 um, 250mm×4.6mm）或同等性能的色谱柱。

流动相：0.05mol/L乙酸钠溶液（4.9）—甲醇（4.4）=65+35。

流速：1.0mL/min。

检测波长：激发波长462nm,发射波长522nm。

进样量：20uL。

6.2.2 标准曲线绘制

将维生素B₂标准系列工作液（4.12.3）依次进行色谱测定,记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

6.2.3 试液测定

将试液进行色谱测定，从标准曲线中查得试液相应的浓度。

6.2.4空白试验

除不加试样外，按上述操作步骤进行。

7 分析结果的表述

试样中维生素B₂的含量按式（1）计算：

式中：

X——试样中维生素B₂的含量（以核黄素计），单位为毫克每百克（mg/100g）；

c——试液的进样浓度，单位为微克每毫升（ug/mL）；

V—试样定容体积，单位为毫升（mL）；

m——试样质量，单位为克（g）。

以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。

8 精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

9 其他

本标准定量限为：当取样量为10.00g时，0.05mg/100g。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（一）》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。