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1 范围
本标准规定了食品中蛋白质的测定方法。
本标准第一法和第二法适用于各种食品中蛋白质的测定,第三法适用于蛋白质含量在10g/100g以上的粮食、豆类、奶粉、米粉、蛋白质粉等固体试样的筛选测定。
本标准不适用于添加无机含氮物质、有机非蛋白质含氮物质的食品测定。
2 规范性引用性文件
本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。
3 原理
食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸镏使氨游离,用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。
4 试剂和材料
除非另有规定,本方法中所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。
4. 1 硫酸铜(CuSO4·5H2O)。
4. 2 硫酸钾(K2SO4)。
4.3 硫酸(H2SO4密度为1.84g/L)。
4.4 硼酸(H3BO3)。
4.5 甲基红指示剂(C15H15N3O2)。
4.6 溴甲酚绿指示剂(C21H14Br4O5S)。
4.7 亚甲基蓝指示剂(C16H18ClN3S·3H2O)。
4.8 氢氧化钠(NaOH)。
4.9 95%乙醇(C2H5OH)。
4.10 硼酸溶液(20g/L):称取20g硼酸,加水溶解后并稀释至1000mL。
4.11 氢氧化钠溶液(400 g/L):称取40 g氢氧化钠加水溶解后,放冷,并稀释至100 mL。
4.12 硫酸标准滴定溶液(0.0500mol/L)或盐酸标准滴定溶液(0.0500 mol/L)。
4.13 甲基红乙醇溶液(1g/L):称取0.1g甲基红,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100 mL。
4.14 亚甲基蓝乙醇溶液(1 g/L):称取0.lg亚甲基蓝,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL。
4.15 溴甲酚绿乙醇溶液(1 g/L):称取0.lg溴甲酚绿,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100 mL。
4.16 混合指示液:2份甲基红乙醇溶液(4.13)与1份亚甲基蓝乙醇溶液(4.14)临用时混合。也可用 1份甲基红乙醇溶液(4.13)与5份溴甲酚绿乙醇溶液(4.15)临用时混合。
5 仪器和设备
5.1 天平:感量为1mg。
5.2 定氮蒸镏装置:如图1所示。
5.3自动凯氏定氮仪。
文章来源:《食品安全国家标准汇编检验方法(一)》
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