4.3.3.3 正式试验

4.3.3.3.1 动物数

单一性别，实验动物数一般为6只～9只。

4.3.3.3.2 剂量

选择起始剂量和剂量梯度系数时，如果没有受试物LD₅₀的估计值资料，默认的起始剂量为175mg/kg体重;如果没有受试物的剂量-反应曲线斜率的资料,默认的剂量梯度系数为3.2(是斜率为2时的梯度系数)，所设定的剂量系列为1.75mg/kg体重、5.5mg/kg体重、17.5mg/kg体重、55mg/kg体重、175mg/kg体重、555mg/kg体重、2000mg/kg体重或1.75mg/kg体重、5.5mg/kg体重、17.5mg/kg体重、55mg/kg体重、175mg/kg体重、555mg/kg体重、1750mg/kg体重、5000mg/kg体重。对于剂量反应曲线斜率比较平缓或较陡的受试物,剂量梯度系数可加大或缩小,起始剂量可作适当调整。

4.3.3.3.3 方法

试验开始时称量禁食后动物的体重,计算灌胃体积。经口灌胃，一次一只动物，每只动物的灌胃间隔时间为48h。第二只动物的剂量取决于第一只动物的毒性结果，如动物呈濒死状态或死亡，剂量就下调一级;如动物存活，剂量就上调一级。

4.3.3.3.4 终止试验的规定

是否继续给予受试物取决于固定的时间间隔期内所有动物的生存状态，首次达到以下任何一种情况时，即可终止试验：

a)在较高剂量给予受试物中连续有3只动物存活；

b)连续6只动物给予受试物后出现5个相反结果；

c)在第一次出现相反结果后，继续给予受试物至少4只动物,并且从第一次出现相反结果后计算每一个剂量的似然值,其给定的似然比超过临界值。依照试验结束时的动物生存状态即可计算受试物的LD₅₀。

如果给予受试物后动物在试验的后期才死亡,而较该剂量还高的动物仍处于存活状态,应当暂时停止继续给予受试物，观察其他动物是否也出现延迟死亡。当所有已经给予受试物的动物其结局明确后再继续染毒。如果后面的动物也出现延迟死亡，表示所有染毒的剂量水平都超过了LD₅₀,应当选择更适当的、低于已经死亡的最低剂量的两个剂量级重新开始试验,并要延长观察期限。统计时延迟死亡的动物按死亡来计算。

4.3.4 寇氏(Korbor)法

4.3.4.1 预试验

除另有要求外,一般应在预试验中求得动物全死亡或90%以上死亡的剂量和动物不死亡或10%以下死亡的剂量,分别作为正式试验的最高剂量与最低剂量。

4.3.4.2 动物数

除另有要求外，一般设5个～10个剂量组，每组每种性别以6只～10只动物为宜。

4.3.4.3 剂量

将由预试验得出的最高、最低剂量换算为常用对数,然后将最高、最低剂量的对数差,按所需要的组数,分为几个对数等距(或不等距)的剂量组。

4.3.4.4 观察

给予受试物后，观察期内记录动物死亡数、死亡时间及中毒表现等。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（二）》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。