显微鉴别法，系指用显微镜对药材(饮片)切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末制剂中的饮片组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。鉴别时选择具有代表性的供试品，根据各药材鉴别项的规定制片，制剂根据不同剂型适当处理后制片。

显微鉴别法适用于：药材形状特征不明显或外形相似而组织结构不同；药材呈粉末状或已破碎，不易辨认或区分；凡含药材粉末的制剂；用显微化学方法确定药材中有效成分在组织中的分布状况及其特征。

在进行显微鉴别时，首先要将样品制成适于镜检的标本。对于完整的药材可制成各种切面的切片；对于粉末药材(包括丸、散等成方制剂)可直接装片或作适当处理后制片。

一、药材(饮片)的显微制片

(一) 切片

将供试品切成极薄的横切片或纵切片，一般片厚为10～20um，将其放在载玻片上，封藏在适宜的介质中，必要时可将切片先进行透化或染色等处理，然后封藏。按切片手段的不同可分为机器切片法和徒手切片法。机器切片法又可分为滑走切片法、石蜡制片法和冰冻切片法。一般多用徒手切片法及滑走切片法，石蜡切片法因操作时间较长，主要用作永久制片。1.徒手切片法徒手切片法是较常用而且比较简便的基本切片方法，制成的切片可保持细胞和后含物的原有形态，便于进行各种显微化学反应，但需要有较熟练的操作技术。新鲜的材料可以直接切片，对于干材料要进行软化处理，而对于柔软的材料则要依靠支持物夹持才能进行切片。一般左手抓材料，右手执刀片，使刀锋自左前方向右后方斜滑切削，即可得到薄片，切片时要保持材料平整，并注意材料和刀片上保持湿润。徒手切片一般不染色，而直接封藏在适宜的试剂中，如滴加甘油醋酸试液、水合氯醛试液、或其他试液1～2滴，盖上盖玻片，必要时滴加水合氯醛试液后，在酒精灯上加热透化，并滴加甘油乙醇试液或稀甘油，盖上盖玻片。制好的切片还要贴上标签，注明名称、编号、日期等。

2. 机器切片法

(1) 滑走切片法：滑走切片法是利用滑走切片机，将材料夹在上面直接进行切片。该法主要用于较坚硬中药的切片。

(2) 石蜡制片法：石蜡制片法是目前中药材重要的、常用的、效果较好的切片方法之一，但缺点是其制片周期较长。石蜡制片法是借助于石蜡的特性，以其作为材料的填充剂和包埋剂，用石蜡切片机进行切片的制作方法。

石蜡制片的步骤及操作基本过程如下：取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→粘片→脱蜡→染色→透明→封藏。

(二) 粉末制片

将供试品按要求取样后，供试品粉末通过四或五号筛，挑取少许置载玻片上。根据观察目标物的不同可以选用不同的试剂制片，主要有：

1. 甘油醋酸试液(斯氏液)制片取少许供试品粉末，加斯氏液2～3滴，用细玻棒或解剖针搅匀，再用镊子将盖玻片沿一边轻轻放下，使试液自然展匀即可。该方法主要用于观察淀粉粒、多糖类物质及菌丝等，并可配合偏光显微镜观察淀粉粒的特征。

2. 水合氯醛试液制片水合氯醛试液能渗透组织，使皱缩的细胞膨胀，并能溶解淀粉粒、蛋白质、多糖、树脂、挥发油和叶绿素等物质，使组织细胞透明清晰。方法是取少许供试品粉末，加水合氯醛试液2～3滴，用细玻棒或解剖针搅匀并在酒精灯上加热透化(注意随时添加水合氯醛试液，勿使试液蒸干)，透化好后滴加稀甘油1滴混匀，盖上盖玻片。

(三) 表面制片

主要用于观察叶片、花瓣、花萼和其他器官表皮的细胞形状、气孔、腺毛、非腺毛的类型和角质层的纹理以及各种细胞内含物的显微特征。应用时根据材料的性质不同，选择不同的方法制片，如较薄的片状材料可采用整体封片法，部分较厚的材料则可撕离其表皮进行封藏。各种制片的方法如下：

1. 整体封片法适用于很薄的叶片、萼片和花瓣等中药的观察。将供试品湿润软化后，剪取欲观察部位4mm²，一正一反置载玻片上，加适宜的试液或加水合氯醛试液加热透化，盖上盖玻片。

2. 表皮撕离法适用于较厚的叶片、萼片、花瓣或者浆果和茎的表皮等材料。将供试品湿润软化后，用镊子撕取表皮；也可将材料反转，用解剖刀将不需要的各层组织轻轻刮除，只留下表皮。将得到的表皮正面朝上放在载玻片上，同上法操作，封片。

二、含饮片粉末制剂的显微制片

供试品为散剂、胶囊剂(内容物为颗粒状应研细)可直接取适量粉末；供试品为片剂，取2～3片；水丸、糊丸、水蜜丸、锭剂等(包衣者除去包衣)，取数丸或2～3锭，分别置乳钵中研成粉末；蜜丸应将药丸切开，从切面由外至中央挑取适量样品或用水脱蜜后，吸取沉淀物适量。根据观察对象不同，分别按粉末制片法制片(1～5片)。

文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(五)》

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