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显微测量系指用目镜测微尺,在显微镜下测量细胞及细胞内含物等的大小。
一、目镜测微尺
放在目镜筒内的一种标尺,为一个直径18~20mm的圆形玻璃片,中央刻有精确等距离的平行线刻度,长为50格或100格(图6-1)。
二、载物台测微尺
在特制的载玻片中央粘贴一刻有精细
尺度的圆形玻片。通常将长1mm(或2mm)精确等分成100格(或200格),每1小格长为10um,用以标定目测镜微尺(图6-2)。
图6-1目镜测微尺
三、目镜测微尺的标定
用以确定使用同一显微镜及特定倍数的物镜、目镜和镜筒长度时,目镜测微尺上每一格所代表的长度。
取载物台测微尺置显微镜载物台上,在高倍物镜(或低倍物镜)下,将测微尺刻度移至视野中央。将目镜测微尺(正面向上)放入目镜镜筒内,旋转目镜,并移动载物台测微尺,使目镜测微尺的“0”刻度线与载物台测微尺的某刻度线相重合,然后再找第二条重合刻度线,根据两条重合线间两种测微尺的小格数,计算出目镜测微尺每一小格在该物镜条件下相当的长度(um)。
图6-2载物台测微尺
当测定时要用不同的放大倍数时,应分别标定(图6-3)。
图6-3目测镜微尺的标定
表示视野中目镜测微尺与载物台测微尺的重合线
四、测量方法
将需要测量的目标物显微制片置显微镜载物台上,用目镜测微尺测量目标物的小格数,乘以上述每一小格的微米数。通常是在高倍镜下测量,但欲测量较长的目标物,如纤维、导管、非腺毛等的长度时,需在低倍镜下测量。记录最大值与最小值(um),允许有少量数值略高或略低于规定。
国外对粉末生药的显微鉴定已有百年历史了。早在1921年美国A.Schneider所著《粉末植物生药显微分析》(第2版),较全面、详细地叙述研究粉末植物生药的通则、操作方法、显微描述及检索表的编列等,收载了210种粉末生药显微特征和特征图。这本著作是早期最著名的粉末生药学专著,迄今仍有重要参考价值。随后在各国生药学书籍和国家药典中大多有粉末生药显微鉴定的内容。1975年B.P.第一部收载植物药116种的显微鉴别项,1981年《日本药局方第十改正》二部收载粉末生药48种显微鉴别项,2002年版《欧洲药典》收载有14种植物药的显微鉴别项,2004年版美国药典收载了20种生药显微鉴别项等。
我国从1951年起对粉末中药显微鉴定逐渐开展研究,20世纪60年代后针对1963年版《中国药典》收载的中药材、中成药品种进行了系统的显微鉴定研究。同时,建立了中成药的粉末显微鉴定的方法,对66种中成药及原料药材154种的粉末特征汇集成文,为1977年版《中国药典》收载显微鉴别项提供了科学的依据。从1977年版直至2015年版《中国药典》,显微鉴别已成为我国药典中药材(饮片)和含饮片粉末的制剂鉴别的重要方法之一。2010年版《中国药典》配套丛书《中药材显微鉴别彩色图谱》的编写,对山麦冬、木贼等38种中药材饮片显微特征进行了修订,同时还完善中成药显微鉴别特征的表述,即首次在显微特征后标明饮片名称,如三妙丸标准中[鉴别](1)表述“草酸钙针晶长10~32um,不规则地充满薄壁细胞中(苍术)。纤维束鲜黄色,周围细胞含草酸钙方晶,形成晶纤维,含晶细胞壁木化增厚(黄柏)。木纤维成束,壁较薄。非木化,纹孔斜裂缝状、人字状或十字状(牛膝)。”
相关链接:药材的显微制片
文章来源:《食品安全国家标准汇编食品添加剂(五)》
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