[检测意义]

反式脂肪酸(transfattyacids，TFAs)是一类具有反式双键构型的不饱和脂肪酸的总称。有研究指出其能增加患心血管疾病的风险，对糖尿病、婴幼儿生长发育、脂肪酸缺乏症等也有不利影响。由于反式脂肪酸对人体健康构成潜在的威胁，很多国家出台了限制食品中反式脂肪酸的法规与措施，如美国食品与药物管理局(FDA）从2006年起要求所有含油脂产品标识反式脂肪酸的含量。反式脂肪酸的检测方法主要有红外光谱法（IR)、阴离子薄层色谱法（Ag-TLC)、气相色谱法(GC)等，其中GC最为常见，且研究较多。

速溶饮品因其方便性受到人们的欢迎，但其中常添加植脂末作为稳定剂，用来改善口感。植脂末中的氢化植物油含有反式脂肪酸，因此对速溶饮品中反式脂肪酸含量的检测具有重要意义。

微波辅助提取是一种利用微波能量的快速提取方法。与传统方法相比，微波辅助提取具有效率高、省溶剂、低废料的特点，并已广泛应用于食品、环境、化工领域。

〔材料与试剂〕

(1)速溶咖啡、速溶木瓜粉、速溶椰子粉（购自当地超市）。

(2）脂肪酸甲酯混合标准品（溶于二氯甲烷，总质量浓度10mg/mL)。

(3)正己烷（色谱纯）。

(4)石油醚、乙醚、甲醇、无水乙醇、浓盐酸、氢氧化钾、无水硫酸钠等试剂（分析纯）。

(5）实验用水均为超纯水。

[采样地点]

超市、食品商店等。

[仪器与设备]

基本配置：微波消解仪；气相色谱仪（配有FID检测器）；色谱数据工作站（注：根据实验室实际情况可以增加相关设备）。

[方法]

(1)样品提取

①传统提取：取溶解后的氢化油样品2～3滴，加入2mL 0.5mo1/L NaOH-CH₃OH溶液，在65℃皂化30min，升温至70℃，加入2mLBF₃-CH₃OH(1：3，体积比）溶液（现配现用），加热3min时间不能过长）。冷却至室温，加入2mL正庚烷，摇匀，静置分层，取上层有机相1mL，加入少量无水硫酸钠干燥备用。

②微波辅助提取：利用微波方法取代水解方法的水浴消化步骤，其余步骤均与传统方法相同。

(2)甲酯化方法称取约50mg提取的脂肪样品，置于10mL具塞试管中，加入3.5mL正己烷将其完全溶解。加入2mol/L KOH一甲醇溶液0.5mL，充分振荡20min。静置后加入超纯水，使有机相上移至试管顶部，混匀后静置，取澄清上层液置气相色谱中，待测。

(3)气相色谱检测条件色谱柱（参考条件，以实际色谱条件）。

①ＤB-23毛细管柱（60m×0.25mm,0.25um)。

②载气（N₂）流速1.3mmin，恒流模式。

③进样量1uL;分流比50:1。

④进样口温度260℃；检测器温度280℃。升温程序：60℃保持1min；以5℃/min升至165℃，保持1min；再以2℃/min升至200℃保持5min；最后以4℃/min升至250℃，保持15min。

〔定量分析〕

采用峰面积校正归一化法定量各脂肪酸甲酯含量。当碳原子数目≥8时，脂肪酸甲酯含量可代替脂肪酸甘油酯含量。

〔结果分析〕

有营养专家认为，反式脂肪酸很难被人体接受、消化，容易导致生理功能出现多重障碍，是人类健康的“杀手”。我国政府一直在积极倡导健康生活方式和平衡膳食，以减少总脂肪及反式脂肪酸的摄入。原卫生部于2007年发布的《中国居民膳食指南》建议，我国居民要“远离反式脂肪酸，尽可能少吃富含氢化油脂的食物”。世界卫生组织建议：为增进心血管健康，应尽量控制膳食中的反式脂肪酸，最大摄取量不超过总能量的1%。也就是说，如果按一个成年人平均每天摄入能量2000kcal(1kcal=4.1868J)来算，则每天摄入反式脂肪酸不应超过2.2g。原卫生部有调查显示“我国城市居民每天摄入的反式脂肪酸平均在1g左右”。

根据实验结果判断产品中反式脂肪酸的含量。

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文章来源：《食品快速检测实训教程》

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