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[检测原理]
牛乳中青霉素酶活力检测试剂盒采用间接竞争法,利用青霉素酶可分解牛乳样品中的β-内酞胺类抗生素的原理,通过配体-受体识别法快速测定与青霉素酶反应后残留的青霉素G的含量,从而检测牛乳样品中残留的青霉素酶。
本试剂盒1h内便可检测到牛乳样品中残留的青霉素酶,在(40±3)℃温育45min后,极低浓度的青霉素酶便可以催化水解4ug/kg的青霉素G。
适用范围:可检测到牛乳样品中残留的青霉素酶。
[仪器与试剂]
温育器,冰箱或保温箱,单道微量移液器。
微量移液器吸嘴(盒装96支),含特定浓度青霉素G的玻璃瓶装试剂,试剂筒(包括8孔微孔试剂和8条测试条),阴性质控(不含抗生素和酶的原乳干粉)试剂。
[操作方法]
吸取400uL牛乳样品加到含有一定浓度青霉素G的玻璃试剂瓶中,混合均匀。(40±3)℃温育45min。
吸取200uL温育后牛乳样品加到装有冻干试剂的微孔中,混合均匀。(40±3)℃下温育3min。
测试条插入到微孔中,(40±3)℃下继续温育3min。
[结果判定]
阳性(+)牛乳样品中掺有青霉索酶:如果牛乳样品中含有青霉素酶,青霉素G由于降解,不能抑制青霉素受体与测试条俘获带的结合,则测试条的检测线(T线)区会出现红色条带,而控制线(C线)区会出现浅红色的条带。
阴性(-)牛乳样品中不含青霉素酶:如果牛乳样品中没有掺杂青霉素酶,或者青霍素酶含量少于可检测到的范围,玻璃瓶中的青霉素G会与青霉素受体结合,从而将会抑制青霉素与俘获带的结合,所以在测试条上只有控制线(C线)区一个条带显色。
所有温育结束后,15min内读玫结果。如超过15min检测结果视为无效。测试条干燥后颜色会增加。如发现阳性检测结果,需要进行确证。
[注意事项]
(1)试剂盒应保存在2~8℃的阴凉干燥处。使用前从冰箱取出,恢复至室温后开始使用。
(2)阴性质控需要用1mL纯净水还原,混合均匀。阴性质控加纯净水还原后需在-20℃保存,避免反复冻融。
(3)该方法不能用于检测酸乳。
(4)首先要确保待测牛乳样品是抗生素检测结果阴性。
文章来源:《食品快速检测实训教程》
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