[检测意义]

三聚氰胺(Melamine，CAS：108-78-1)分子式为C₃N₆H₆或C₃N₃(NH₂)₃，学名为1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺，简称三胺、蜜胺，是一种二嗪类含氮杂环有机化合物。常压下，三聚氰胺为纯白色单斜棱晶体，无味，溶于热水、甲醇、甲醛、乙酸，微溶于冷水，不溶于醚、苯和四氯化碳，广泛应用于木材、塑料、涂料、造纸、纺织、皮革等轻工生产领域。由于食品和饲料工业蛋白质含量测试方法的缺陷，三聚氰胺也常被不法分子用作添加剂以提高乳制品检测中蛋白质的含量，因此三聚氰胺也被称为“蛋白精”。毒理学研究显示，动物长期摄入三聚氰胺会造成泌尿系统损害，引起膀胱及肾结石，并可进步引起移行性细胞增生而诱发膀胱癌。婴儿乳粉添加三聚氰胺事件冲击了整个乳制品行业，导致了国内乳制品行业的诚信危机，引起了世界范围对乳制品添加三聚氰胺的重视。因此，通过简便有效的技术手段，快速检测乳制品中的三聚氰胺残留，对确保食品安全具有十分重要的意义。

目前，食品中三聚氰胺的检测方法主要有IPLC、HPLC-MS、GC-MS、ELISA法、毛细管电泳法等。上述检测技术具有检测限低，精确度高，方法稳定等优点，但也有检测仪器昂贵，操作繁琐，样品前处理复杂，耗时长，检测费高，不易普及等缺点。

本法适用于原料乳、纯乳、纯乳粉、纯酸乳以及饲料(植物性副产品饲料如大豆蛋白质、米蛋白质浓缩物、粉碎玉米干燥后的外皮纤维、麦麸、马铃薯蛋白质等)中三聚氰胺的现场快速筛查。

[检测原理]

将检测液加入速测卡加样孔，检测液中的三聚氰胺与金标垫上的金标抗体结合形成复合物，若三聚氰胺在检测液中浓度低于1000ng/mL，未结合的金标抗体流到T区时，被固定在膜上的三聚氰胺-牛血清白蛋白(BSA)偶联物结合，逐渐凝集成一条可见的T线。

若三聚氰胺浓度高于1000ng/mL，金标抗体全部形成复合物，不会再与T线处三聚氰胺-BSA偶联物结合形成可见T线。

未固定的复合物流过T区被C区的二抗捕获并形成可见的C线。C线出现则表明免疫色谱发生，即试纸有效，检测灵敏度可根据客户需要设置为1mg/L、3mg/L等。

[操作步骤]

(1)原料处理

①原料乳：取生产用原料乳1mL加入到1.5mL离心管中，3000r/min离心约5min至分离出脂肪层。脂肪层下5mm处液体即为待测液。

②乳粉或饲料：取1g样品于试管巾，加入5mL纯净水，将试管放入一杯开水中，摇动使样品溶解，离心使其分层，稀溶液为待测液。

③鲜牛乳：直接使用样品加样检测。

(2)测定将三聚氰胺检测卡片置于干净平坦的台面上，用塑料吸管垂直滴加3滴无空气样品处理液于加样孔(S)内；等待紫红色条带的出现，测试结果应在5min时读取。

[结果判定]

如图7-1所示。

图7-1 胶体金免疫色谱竞争法快检测三聚氰胺结果判断示意图

(1)灵敏度(阈值) 根据每种检测卡控制浓度而定，判断前请向供应厂家咨询控制阈值。

(2)阳性(+) 仅质控区(C)出现一条紫红色条带，在测试区(T)内无紫红色条带出现。

(3)阴性(-) 两条紫红色条村出现。一条位于测试区(T)内，另一条位于质控区(C)内。

(4)无效 质控区(C)未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或检测卡已变质损坏，应重新测试1次，如仍为此现象，应更换检测卡或联系供应厂家。

(5)阳性结果 表明三聚氰胺含量在阙值以上，阴性结果表明三聚氰胺含量在阈值以下。

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文章来源：《食品快速检测实训教程》

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