尿液中95％左右是水，5％左右是溶于水的化合物，主要包括尿素、尿酸、肌氨酸酐、氯化钠以及其他100多种低含量化合物。这些低含量化合物包括有机物，例如，碳水化合物、酶、脂肪酸、荷尔蒙、色素以及糖基化蛋白质等；还有无机物，例如，钾、镁、钙、氨、硫酸根、磷酸根等。正常人尿液的主要成分及含量。尿液的物理及化学组成因食物的不同、体重的不同、食物代谢的速度等因素而变化很大。新采集的尿液通常是清澈的。随着放置时间增加，尿液会变得浑浊、出现絮状沉淀物。

尿液是许多实验室经常遇到的样品，包括动物尿液和人尿液。例如，在对动物源食品检测中的动物尿液、兴奋剂检测中的运动员尿液、临床药物分析中病人的尿液、司法检验中的嫌疑人的尿液等。许多药物进入体内经过肝脏代谢才由肾脏排出体外。代谢转化包括羟基化作用、氧化作用、去烷基化作用等。

尿液中含有大量的盐，一般都需要用至少等体积的水或缓冲溶液进行稀释。对于离子交换固相萃取，这一点尤为重要。如果目标化合物在体内代谢过程中与葡萄糖苷酸或硫酸根形成共轭状态，就需要通过水解的方法将其释放出来。例如尿液中的THC-COOH、苯二氮革类β-兴奋剂等。水解的方法主要有酸水解、碱水解和酶水解。酶水解通常较为繁琐，但是酶水解的好处是只切割对酶有活性的部分。因此，与酸水解和碱水解比较，酶水解可以得到更干净的萃取物。

(1)尿液的酸水解方法

(a)在试管中加入5 mL尿液、内标物和500μL浓盐酸，振荡／混合。

(b)将试管放人沸水浴中加热20 min。

(c)冷却后离心，除去沉淀物。

(d)加入1 mL 7.4 mol／L NH4OH，振荡／混合。

(e)用1～3 mL缓冲液调节样品的pH。

酸水解主要用于碱性共轭物的水解。如果是酸性共轭物，例如，四氢大麻酚共轭物等，则应该用碱水解。在碱水解法中可以用氢氧化钾或氢氧化钠取代盐酸。

(2)尿液的酶水解方法

(a)在试管中加入5 mL尿液、内标物和2 mLβ-葡萄糖苷酸酶溶液。β-葡萄糖苷酸酶溶液是每毫升1.0 mol／L醋酸缓冲溶液(pH 5.0)中含5000 FU单位的β-葡萄糖苷酸酶。建议使用由Patella vulgate或1impets得到的β-葡萄糖苷酸酶。

(b)60 ℃～65 ℃酶解2h。

(c)对冷却后的样品离心10 min，除去沉淀物。

(d)加入大约700μL 1.0mol／L NaOH将pH调节为6.0±0.5。