一、实验目的

1．学会测定生物样品中氟的生物样品前处理方法。

2．熟悉离子选择电极法。

二、实脸原理

含氟生物样品中氟在（大量）氯化钠存在的条件下，于强碱性溶液中，通过加温、加压的方式，分解游离出来（以F一的形式）。样品中分解游离出来的F一借助氟离子选择电极对氟的选择性响应而得以定量。

三、仪器

(1)医用压力灭菌锅。

(2）电磁搅拌器。

(3)离子计或精密酸度计。

(4）饱和甘汞电极。

(5)氟离子选择电极。

(6）比色管50mL。

(7）容量瓶50mL。

(8）塑料烧杯50mL。

(9）容量瓶100mL。

四、试剂

1．实验室准备部分

(1)氢氧化钠（固体）。

(2)氯化钠（固体）。

(3）冰醋酸。

(4）浓盐酸。

(5)二水柠檬酸钠。

(6)1％酚酞指示剂。

(7)氟标准储备液称取（于120℃烘箱中干燥3h)氟化钠1.1050g于100mL烧杯中，用去离子水溶解，转入1000mL容量瓶中，用去离子水洗涤烧杯数次，并入容量瓶中，定容至刻度，此溶液为500.0μg/mL氟标准储备液。

2．学生准备部分（用量自己设计）

(1)25.00μg/mL氟标准使用液。

(2)10mmol/L氢氧化钠溶液。

(3)20%氯化钠溶液。

(4)1:1盐酸。

(5）总离子强度缓冲液取14mL冰醋酸和3g含2个结晶水的柠檬酸钠，加入60mL去离子水。搅拌溶解后，用10 mol/L氢氧化钠溶液调节pH=5.2，冷却后稀释至100mL。

五、实验步骤

1．工作曲线绘制

将氟化钠标准储备液稀释成含氟25.00ug/mL的标准溶液，于6支50ML比色管中分别加入氟标准使用液0.00,0.20mL,0.50mL,1.00mL,2.00mL,5.00mL，加入10mol/L氢氧化钠2mL ,20%o氯化钠2mL，松松盖上塞子，外用纱布块和棉线包扎塞子（防止加热后塞子冲出）。置于压力灭菌锅内，于120℃,15kg/cm²压力下，消解40min。放置0.5h，放气后取出
比色管，冷却，加入1%酚酞指示剂3滴，比色管置于冷水浴内，滴加1：1盐酸溶液并不断搅拌至溶液红色褪去，并过量3滴（此时用广泛pH试纸测得pH值为5-5.5)。用经30mL去离子水洗涤干净的慢速定性滤纸过滤溶液至50mL容量瓶中，用少量水分数次洗涤比色管和滤纸，并入容量瓶中，使总体积不超过40mL，加入10mL总离子强度缓冲液，并用水稀释至刻度。转入50mL烧杯中，将电极插人溶液中，开动电磁搅拌器，搅拌2~3min，电位稳定后读数，在（半）对数坐标纸上绘制工作曲线。

2．样品测定

取生物样品2~3g于50mL比色管内，加入10mol/L氢氧化钠溶液2mL和20％氯化钠溶液2mL，使样品位于比色管底部，松松盖上塞子，外用纱布和棉线包扎塞子，置于压力灭菌锅内进行消解，余下操作同工作曲线的绘制（加1:1盐酸前，先加入去离子水至总体积约为15mL，滴入盐酸时会产生大量白色有机物沉淀）。测定电位值后，由工作曲线查得氟含量。

3．结果计算

生物样品中含氟量（mg/kg)=测得值（ug)/取样值（g）

六、注意事项

1．消解液应为棕色，不应有絮状碎肉物。

2．消解液中加入盐酸时析出大量白色有机物沉淀，最终pH值要达到5~5.5,pH值不宜过高，否则，在加入总离子强度缓冲液时，会出现沉淀物。

3．消解时要松松盖上塞子，以免结束时，不易取下塞子。