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造血干细胞自我更新的性能,由于其复制方式为不对称分裂,且缺乏可靠的人类干细胞定量检测方法,因此,目前还难以对造血干细胞的扩增进行准确评估,但CD34十造血干细胞具有良好的扩增反应。这种扩增具有很好的临床应用前景,可以应用于常规异体移植的配型以及移植物抗宿主反应的检测。
取骨髓、脐带血或动员后的外周血,用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,用20%马血清MEM培养基制成单细胞悬液,应用流式细胞仪进行CD34十细胞的筛选。CD34+细胞在SCF、IL-1、IL-3、IL-5、GM-CSF、C-CSF、EPO、PIXY321等细胞因子的不同组合刺激下,经8-14天即可扩增细胞总数30-1000倍,集落形成细胞(包括CFU-GM、BFU-E、CFU-GEMN)也可被扩增41-190倍。但这些因子的组合在扩增造血细胞的同时,也明显地加速了造血干/干细胞的分化,至21天时,绝大部分细胞已分化为较成熟的血细胞,因此,如何在扩增造血细胞的同时,又尽可能地保留造血干细胞分化潜能,使其在数量上和功能上满足临床治疗的需要,仍然是体外细胞扩增研究的重点。已有报道,白血病患者经过大剂量化疗后,应用其化疗前保存的外周血细胞扩增并回输,可以重建患者的造血系统。
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