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细胞传代消化时所用胰蛋白酶浓度越高越好吗?

发布时间:2016-03-04 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:2946

不是!胰蛋白酶底物特异性差,对细胞膜有破坏。另外,胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH,温度、胰蛋白酶浓度及溶液中是否含有Ca2+、Mg2+离子和血清等因素有关。通常情况下,pH8.0、温度37℃其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。通常使用的消化液浓度为:①0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;②0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA;③0.25%胰蛋白酶。溶液pH8.0-9.0;使用D-Hank液配制。

大多数细胞传代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。

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