1 范围

GB/T 18932的本部分规定了蜂蜜中甘油含量紫外分光光度测定方法。

本部分适用于蜂蜜中甘油含量的测定。

本部分甘油的方法检出限为20mg/kg。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过GB/T 18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。

GB/T 6379-1986测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性(neq ISO 5725:1981)

GB/T 6682-1992分析实验室用水规格和试验方法(neq ISO 3696:1987)

3 原理

甘油在甘油激酶催化作用下，与腺苷-5'-三磷酸盐反应生成L-甘油-3-磷酸盐和腺苷-5'-二磷酸盐。而生成的腺苷-5'-二磷酸盐在丙酮酸盐激酶的存在下，又与磷酸烯醇丙酮酸盐反应，再转化成腺苷-5'-三磷酸盐和丙酮酸盐。丙酮酸盐在L-乳酸盐脱氢酶的作用下，被烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原为L-乳酸盐。通过在340 nm测定烟酰胺腺嘌呤二核苷酸消耗量，计算出甘油含量。

4 试剂和材料

4.1 溶液-Ⅰ：2.0g辅酶和甘氨酸缓冲溶液的混合物，pH=7.4。其中缓冲溶液中含有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，7mg；腺苷-5'-三磷酸盐，22 mg;磷酸烯醇丙酮酸盐，11 mg；硫酸镁；稳定剂。贮存在4℃冰箱里。使用前在室温下放置1h，加入11mL水，使之完全溶解，摇匀。

4.2 溶液-Ⅱ：0.4 mL的悬浊液。含有丙酮酸盐激酶，240 U; L-乳酸盐脱氢酶，220 U。贮存在4℃冰箱里。使用前在室温下放置1 h。

4.3 溶液-Ⅲ：甘油激酶悬浊液，34 U。贮存在4℃冰箱里。使用前在室温下放置1 h。

4.4 甘油标准溶液：394mg/L。贮存在4℃冰箱里。使用前在室温下放置1h。仅作为测定质量监控用，测定值与给定值允许差为5％。

4.5 水为GB/T 6682-1992规定的二级水。

5 仪器

5.1 紫外分光光度计。

5.2 比色皿：1 cm光路。

5.3 天平：感量0.1mg。

5.4 微量注射器：100uL。

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文章来源：《常用兽药残留量检测方法》

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