(一)原理

试样酸化后，用乙醚提取试样中的苯甲酸、山梨酸，用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，再与标准系列比较定量。

(二)仪器和试剂

1．仪器

气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器。

2．试剂

(1)乙醚：不含过氧化物。

(2)石油醚：沸程30～60℃。

(3)盐酸(6 mol／L)。

(4)无水硫酸钠。

(5)盐酸(1+1)：取100 mL盐酸，加水稀释至200ml。

(6)氯化钠酸性溶液(40g／L)：于氯化钠溶液(40g／L)中加少量盐酸(1+1)酸化。

(7)山梨酸、苯甲酸标准溶液：准确称取山梨酸、苯甲酸各0.2000g，置于100 mL容量瓶中，用石油醚一乙醚(3+1)混合溶剂溶解后并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于2．0mg山梨酸或苯甲酸。

(8)山梨酸、苯甲酸标准使用液：吸取适量的山梨酸、苯甲酸标准溶液,用石油醚一乙醚(3+1)混合溶剂稀释至每毫升相当于50、100、150、200、250 µg山梨酸或苯甲酸。

(三)操作步骤

1．试样提取

称取2.50g预先混合均匀的试样，置于25mL带塞量筒中，加0.5mL盐酸(1+1)酸化，用15mL、10mL乙醚提取2次，每次振摇1min，将上层乙醚提取液吸入另一个25mL带塞量筒中，合并乙醚提取液。用3mL氯化钠酸性溶液(40g／L)洗涤2次，静置15min，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入25 mL容量瓶中，加乙醚至刻度，混匀。准确吸取5mL乙醚提取液于5mL带塞刻度管中，置40℃水浴上挥干，加入2mL石油醚一乙醚(3+1)混合溶剂溶解残渣，备用。

2．色谱参考条件

(1)色谱柱：玻璃柱，内径3mm，长2m，内装涂以5％DEGS+1％磷酸固定液的60目80目chromosorb WAW。

(2)气流速度：载气为氮气，50mL／min(氮气和空气、氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最佳比例条件)。

(3)温度：进样口230℃，检测器230℃，柱温170℃。

3．测定

进样2µL标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中，可测得不同浓度山梨酸、苯甲酸的峰高，以浓度为横坐标，相应的峰高为纵坐标，绘制标准曲线。

同时进样2µL试样溶液，测得峰高与标准曲线比较定量。

(四)结果计算

试样中山梨酚或苯甲酸的含量按下式进行计算。

X=A*1000/m*5/25*V1/V2*1000

式中：X——试样中山梨酸或苯甲酸的含量，mg／kg；

A——测定用试样液中山梨酸或苯甲酸的质量，µg；

V₁——加入石油醚一乙醚(3+1)混合溶剂的体积，mL；

V₂——测定时进样的体积，µL；

m——试样的质量，g；

5——测定时吸取乙醚提取液的体积，mL；

25——试样乙醚提取液的总体积，mL。

由测得苯甲酸的量乘以1．18，即为试样中苯甲酸钠的含量。

计算结果保留两位有效数字。

(五)精密度

在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％。

最低检出浓度：气相色谱法最低检出量为lµg，用于色谱分析的试样为1g时，最低检出浓度为1mg／kg。