14 原理

试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，用镀铜镉粒使部分滤液中的硝酸盐还原为亚硝酸盐。在滤液和已还原的滤液中，加入磺胺和N-1-萘基-乙二胺二盐酸盐，使其显粉红色，然后用分光光度计在538nm波长下测其吸光度。

将测得的吸光度与亚硝酸钠标准系列溶液的吸光度进行比较，就可计算出样品中的亚硝酸盐含量和硝酸盐还原后的亚硝酸总量；从两者之间的差值可以计算出硝酸盐的含量。

15试剂和材料

测定用水应是不含硝酸盐和亚硝酸盐的蒸镏水或去离子水。

注：为避免镀铜镉柱(16.10)中混入小气泡，柱制备(17.1)、柱还原能力的检查(17.2)和柱再生(17.3)时所用的蒸镏水或去离子水最好是刚沸过并冷却至室温的。

15.1 亚硝酸钠(NaNO₂)。

15.2 硝酸钾(KNO₃)。

15.3 镀铜镉柱

镉粒直径0.3mm～0.8mm。也可按下述方法制备。

将适量的锌棒放入烧杯中，用40g/L的硫酸镉(CdSO₄·8H₂O)溶液浸没锌棒。在24h之内，不断 将锌棒上的海绵状镉刮下来。取出锌棒，滗出烧杯中多余的溶液，剩下的溶液能浸没镉即可。用蒸镏水冲洗海绵状镉2次～3次，然后把镉移入小型搅拌器中，同时加入400mL 0.1mol/L的盐酸。搅拌几秒 钟，以得到所需粒度的颗粒。将搅拌器中的镉粒连同溶液一起倒回烧杯中，静置几小时，这期间要搅拌 几次以除掉气泡。倾出大部分溶液，立即按17.1.1至17.1.8中叙述的方法镀铜。

15.4 硫酸铜溶液：溶解20g硫酸铜(CuSO₄·5H₂O)于水中，稀释至1000mL。

15.5 盐酸-氨水缓冲溶液：pH9.60～9.70。用600mL水稀释75mL浓盐酸(质量分数为36%～38%)。混匀后，再加入135mL浓氨水(质量分数等于25%的新鲜氨水)。用水稀释至1000mL,混匀。用精 密pH计调pH为9.60～9.70。

15.6 盐酸(2mol/L)：160mL的浓盐酸(质量分数为36%～38%)用水稀释至1000mL。

15.7 盐酸(0.1mol/L)：50mL 2mol/L的盐酸用水稀释至1000mL。

15.8 沉淀蛋白和脂肪的溶液：

15.8.1 硫酸锌溶液：将53.5g的硫酸锌(ZnSO₄·7H₂O)溶于水中，并稀释至100mL。

15.8.2 亚铁氰化钾溶液：将17.2g的三水亚铁氰化钾［K₄Fe(CN)₆·3H₂O］溶于水中，稀释至100mL。

15.9 EDTA溶液：用水将33.5g的乙二胺四乙酸二钠(Na₂C₁₀H₁₄N₂O₃·2H₂O)溶解，稀释至1000mL。

15.10 显色液1：体积比为450:550的盐酸。将450mL浓盐酸(质量分数为36%～38%)加入到550mL水中，冷却后装入试剂瓶中。

15.11 显色液2：5g/L的磺胺溶液。在75mL水中加入5mL浓盐酸(质量分数为36%～38%),然 后在水浴上加热，用其溶解0.5g磺胺(NH₂C₆H₄SO₂NH₂)。冷却至室温后用水稀释至100mL。必要时 进行过滤。

15.12 显色液3:1g/L的萘胺盐酸盐溶液。将0.1g的N-1-萘基-乙二胺二盐酸盐 (C₁₀H₇NHCH₂CH₂NH₂·2HC1)溶于水，稀释至100mL。必要时过滤。

注：此溶液应少量配制，装于密封的棕色瓶中，冰箱中2℃～5℃保存。

15.13亚硝酸钠标准溶液：相当于亚硝酸根的浓度为0.001g/L。

将亚硝酸钠在110℃～120℃的范围内干燥至恒重。冷却后称取0.150g,溶于1000mL容量瓶中， 用水定容。在使用的当天配制该溶液。

取10mL上述溶液和20mL缓冲溶液(15.5)于1000mL容量瓶中，用水定容。

每1mL该标准溶液中含1.00ug的NO₂^-。

15.14硝酸钾标准溶液，相当于硝酸根的浓度为0.0045g/L。

将硝酸钾在110℃～120℃的温度范围内干燥至恒重，冷却后称取1.4580g,溶于1000mL容量瓶 中，用水定容。

在使用当天，于1000mL的容量瓶中，取5mL上述溶液和20mL缓冲溶液(15.5),用水定容。 每1mL的该标准溶液含有4.50ug的NO₃^-。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（一）》

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