6.1.3 非选择性增菌培养基的半定量测试方法

6.1.3.1 培养基的制备

将培养基分装试管，每管10mL。

6.1.3.2 工作菌悬液的制备

将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜或采用其他制备方法,制备10倍系列稀释的菌悬液。

6.1.3.3 接种

在装有待测培养基的试管中接种10CFU～100CFU的目标菌，每管接种量为1mL,接种两个平行管。同时将1mL菌悬液(与试管接种同一稀释度)倾注平板，接种两个平板，作接种量计数用。按标准方法中规定的培养时间和温度进行培养(如增菌时间为8h以下，需取10uL培养后的增菌液倾注到适合的培养基中，再按适合的培养时间和温度进厅培养)。

6.1.3.4 结果解释

用目测的浊度值(如0～2)评估培养基：

—0表示无混浊；

—1表示很轻微的混浊；

—2表示严重的混浊。

目标菌的浊度值应为2。

有时可以观察到微生物生长后聚集成细胞团，沉积在试管或瓶子底部，发生这种情况时，小心振荡试管后再进行观察。

6.1.4 选择性增菌培养基的半定量测试方法

6.1.4.1 培养基的制备

将培养基分装试管，每管10mL。

6.1.4.2 工作菌悬液的制备

按照6.1.3.2中要求进行。

6.1.4.3 接种

6.1.4.3.1 混合菌的接种

在装有待测培养基的试管中接种10CFU～100CFU的目标菌，并接种1000CFU～5000CFU的非目标菌，接种总量为1mL,同时接种两个平行管，混匀。同时分别将目标菌菌悬液(与试管接种同一稀释度)和非目标菌菌悬液(比试管接种小10～100倍稀释度)1mL倾注平板，接种两个平板，作接种量计数用。按标准方法中规定的培养时间和温度进行培养。

6.1.4.3.2 非目标菌的接种

在装有待测培养基的试管中接种1000CFU～5000CFU的非目标菌，接种量为1mL,同时接种两个平行管，混匀。按标准方法中规定的培养时间和温度进行培养。

6.1.4.4 培养液的接种

6.1.4.4.1 混合菌培养液的接种

用10uL接种环取1环经培养后的混合菌培养液，划线接种到特定的选择性平板上，同时每管接种一个平板。按标准方法中规定的培养时间和温度进行培养。

6.1.4.4.2 非目标菌培养液的接种

吸取10uL经培养后的非目标菌培养液，均匀涂布接种到非选择性平板(如TSA)上。同时每管接种一个平板。可使用倾注法进行接种，并按标准规定的培养条件培养平板。

6.1.4.5 计算和结果解释

目标菌在选择性平板上的菌落应＞10CFU，则表示待测液体培养基的生长率良好；非目标菌在非选择性平板上的菌落数应＜100CFU,则表示待测液体培养基的选择性为良好。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（二）》

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