ESI是近年来出现的一种新的电离方式。它主要应用于液相色谱一质谱联用仪。

样品溶液从一根加有数千伏电压的不锈钢毛细管中喷出形成静电喷雾，雾滴带有电荷。当雾滴通过一个逆向的热氮气帘时，雾滴中的溶剂逐渐蒸发。随着溶剂的蒸发，雾滴体积变小，表面电荷密度增加，形成强静电场使极性样品分子离子化，最终离子从雾滴表面“发射出来”。电喷雾是一种非常温和的软电离技术，一般只形成准分子离子［M+H]+，若溶液中含有Na+、K+、NH4+等，还会形成「M+Na]+、[M+K]+、[M+NH4]＋簇离子。

电喷雾电离源是一种软电离方式，即便是相对分子质量大，稳定性差的化合物，也不会在电离过程中发生分解，它适合于分析极性强的大分子有机化合物，如蛋白质、肽、糖等。电喷雾电离源的最大特点是容易形成多电荷离子。这样，一个分子质量为10000Da的分子若带有10个电荷，则其质荷比只有1000Da，进入了一般质谱仪可以分析的范围之内。根据这一特点，目前采用电喷雾电离，可以测量分子质量在300000Da以上的蛋白质。图7-25是由电喷雾电离源得到的肌红蛋白的质谱图。

ESI的主要缺点是它只能接受非常小的液体流量（(1-10μL/min)，而借助气动或超声等雾化技术，可在较高的流速，如1mL/min条件下工作，便于与常规HPLC连接。目前的电喷雾接口已经可安装在四极质谱、磁质谱和飞行时间质谱上，如惠普公司的HP5989B型四极质谱和HP110OLS-MS专用系统，Finigan公司的TSQ-700。四极质谱，MAT-95磁质谱和PE公司的PE-CIEX四极质谱等。