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罗布麻叶是夹竹桃科植物罗布麻(Apocynumvenetum)的干燥叶,是传统的平肝息风类中药。具有降血压、降血脂、抗氧化等药理作用。化学成分研究表明,黄酮类成分为罗布麻叶中的主要成分,目前主要采用高效液相色谱法进行分析,毛细管电泳法具有高效、快速、灵敏度高、样品和试剂用量少、柱寿命长、容易清洗、环境友好、易于自动化等优点,在中药有效成分分析中已得到了不断的推广应用。采用毛细管电泳紫外检测法同时分离测定了6个不同产地罗布麻叶中的山柰酚、槲皮素、异槲皮苷、白麻苷和山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷5种黄酮类化合物的含量,并比较了这5种成分在各产地罗布麻叶中的含量差异,方法简便、快速,为罗布麻叶的质量分析提供了新的分析方法。
1.对照品溶液的制备
精密称取山柰酚0.32mg、槲皮素0.62mg、异槲皮苷3.59mg、白麻苷6.09mg、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷0.58mg,置l0mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,即得混合对照品溶液。置冰箱中((4℃)保存备用。
2.样品溶液的制备
取罗布麻的干燥叶,于50℃下烘3h,将烘干品粉碎,过20目筛,取干燥粉末约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,准确称重,超声提取30min(100W,40kHz)放至室温,再称定重量,甲醇补足减失的重量,滤过,即得。
3.电泳条件
未涂层弹性石英毛细管柱(60.2cm×75μm,有效长度50cm)。以50mmo1/LNa2B4O7(pH9.3)缓冲溶液为电泳介质,进样时间l0s,进样压力3.445kPa,分离电压20kV,检测波长340nm,柱温25℃。毛细管柱第1次使用前用1.0mol/LNaOH溶液、0.lmol/LNaOH溶液、蒸馏水、电泳缓冲溶液各冲洗10min,每次电泳后依次用蒸馏水、0.lmol/LNaOH溶液、蒸馏水、电泳缓冲溶液冲洗2min、3min、2min、4min,以保证重现性。进样5次后,更换缓冲液。所有溶液使用前均用0.45μm滤膜过滤。
4.测定结果
采用毛细管区带电泳法(CZE),在上述优化实验条件下,5种分析物在15min内能够良好分离,混合对照品和样品溶液的分离电泳图谱,如图7-35所示。由含量测定结果可见,异槲皮苷和白麻苷是罗布麻药材中的主要黄酮类成分,各产地药材以陕西产、新疆产罗布麻黄酮类成分较多,含量较高。天津、河北安国、山西产罗布麻成分较为相似,只是含量有所差别。分析结果表明,本方法简便、快速、灵敏、可靠,为罗布麻叶中黄酮类成分的分析提供了一种新的分析方法。
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