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(1)原理 某些细菌产生的胞内酶—马尿酸盐水解酶可以水解马尿酸为苯甲酸和甘氨酸。用三氯化铁与苯甲酸反应生成苯甲酸铁褐色沉淀,或用甘氨酸与茚三酮作用产生紫色化合物(氨一还原型茚三酮)来确认。
(2)培养基 马尿酸钠培养基即1%灭菌马尿酸钠溶液。
(3)试验方法
①将培养物接种于马尿酸钠培养基,于42℃培养48h,离心沉淀(观察培养液是否到达试管壁上记号处,如不足时,用蒸馏水补足至原量),取上清液0.8mL,加人三氯化铁试剂[三氯化铁(FeC13·6HZ0)12g,溶于2%盐酸溶液100mL中即成]0.2mL,立即混匀,经10.15min观察是否有沉淀物出现。
②用2mm接种环取一满环在琼脂平板上培养过夜的生长物,接种1%马尿酸钠溶液中,振摇试管以分散培养物,置37℃水浴中放置2h。在每个试管中加入。.5mL茚三酮试剂(将3.5g应茚三酮于l00mL1:1丙酮和丁醇的混合物中),将试管于室温下放置2h,观察是否有颜色变化(国家标准采用此法)。
(4)结果 生成褐色恒定沉淀或出现紫色者为阳性反应(+);沉淀物消失或无颜色变化为阴性反应(-)。
(5)应用 马尿酸盐水解试验作为区分某些芽孢杆菌的鉴定和黄单胞菌属的鉴定之用。
也可用于空肠弯曲菌鉴定,空肠弯曲菌呈阳性反应。主要用于B群链球菌的鉴定,其马尿酸钠水解试验(+)。
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