水生生物分类鉴定

（一）浮游生物

浮游生物（plankton）是指悬浮在水体中的生物，它们多数个体小，游泳能力弱或完全没有游泳能力。浮游生物可划分为浮游植物和浮游动物两大类。在淡水中，浮游植物主要是藻类，它们以单细胞、群体或丝状体的形式出现。浮游动物主要由原生动物、轮虫、枝角类和挠足类组成。浮游生物是水生食物链的基础，在水生生态系统中占有重要地位。许多浮游生物对环境变化反应敏感，可作为水质的指示生物。

(1）器材

解剖镜、显微镜、解剖针、标本瓶（30^-50mL),浮游生物计数框。

(2)实验室处理

1)样品浓缩

从野外采集并经固定的水样，带回实验室后必须进一步沉淀浓缩。为避免损失，样品不要多次转移。水样直接静置沉淀24h后，用虹吸管小心抽掉上清液，余下20~25mL沉淀物转入30mL定量瓶中。为减少标本损失，再用上清液少许冲洗容器几次，冲洗液加到30mL定量瓶中。

2）样品鉴定、计数

个体计数仍是目前常用的浮游生物定量方法。浮游动物计数时，要将样品充分摇匀，将样品置于计数框内，在显微镜或解剖镜下进行计数。常用计数框容量有0.1ML,1ML,5mL和8ML四种。用定量加样管在水样中部吸液移入计数框内。移入之前要将盖玻片斜盖在计数框上，样品按准确定量注入，在计数框中一边进样，另一边出气，这样可避免气泡产生。注满后把盖玻片移正。计数片子制成后，稍候几分钟，让浮游生物沉至框底，然后计数。不易下沉到框底的生物，则要另行计数，并加到总数之内。
藻类：吸取0.1ML样品注入0.1ML计数框，在10x40倍或8x40倍显微镜下计数，藻类计数100个视野。计数两片取其平均值。如两片计数结果个数相差15％以上，则进行第三片计数，取其中个数相近两片的平均值。

也可采用长条计数法，选取两相邻刻度从计数框的左边一直计数到计数框的右边称为一个长条。与下沿刻度相交的个体，不计数在内，与上、下沿刻度都相交的个体，以生物体的中心位置作为判断的标准，也可在低倍镜下，按上述原则单独计数，最后加入总数之中。一般计数三条，即第2,5,8条，若藻体数量太少，则应全片计数。硅藻细胞破壳不计数。

若计数种属的组成，分类计数200个藻体以上。用划“正”字的方法，则每划代表一个个体，记录每个种属的个体数。参照《中国淡水藻类》进行鉴定。

原生动物的计数：吸取0.1ML样品注入0.1ML计数框，在10x40倍或8x40倍显微镜下计数，全片计数。轮虫则取1ML注入1ML计数框内，在10x8倍显微镜下全片计数。以上各类均计数两片取其平均值。如两片计数结果个数相差15％以上，则进行第三片计数，取其中个数相近两片的平均值。参照《中国淡水轮虫志》、《淡水微型生物图谱》和《原生动物学》进行鉴定。

甲壳动物的计数：将浓缩样吸取8mL（或5mL)，注入计数框，在10x10倍或10x20倍倒置显微镜或显微镜下，计数整个计数框内的个体。亦可将30mL浓缩样分批按此法计数，再将各次计数相加得到30mL样的总个体数。参照《中国动物志（淡水枝角类）》、《中国动物志（淡水挠足类）））进行鉴定。

(3)数据处理

1)浮游藻类

计数结果按下式换算成每升水中浮游植物的数量：

N=nAxVWl(ACxV)

式中，N－每升水中浮游植物的数量，个/L；

A—计数框面积，mm²;

Ac—计数面积，mm²，即视野面积、视野数或长条计数时长条长度x参与计数的长

条宽度x镜检的长度数；

Vw—1L水样经沉淀浓缩后的样品体积，ML;

V—计数框体积，mL;

N一计数所得的浮游植物的个体数或细胞数。

2）浮游动物

每升内某计数类群浮游动物个体数N可按下式计算：

N=nxV1/（V2xV3)

式中，n—计数所得个体数；

V1—浓缩样体积，ML;

V2—计数体积，ML;

V3—采样量，L。

3)鉴定计数完成，整理出各类群的种类和数量的数据，填写完成数据记录表。

(4）质量控制

实验室需建立、积累和更新自己的系统分类学检索资料库及参考标本库，参考标本要有外部分类学专家确定和签名，要保证其固定剂质量，定期更换。

每一个鉴定出的物种需由第二个分类鉴定员复检确认并做好记录。遇到本实验室无法确认的标本需外送鉴定时，要做好外送的日期、目的地、返还日期和鉴定人的姓名等信息记录。

每个分类鉴定员均需定期参加分类学培训及考核，增强分类技能，确保物种的准确鉴定。

10％的样品进行平行处理，包括种类鉴定，数据统计。用Bray-Curtis指数来检验数据的质量，相似度达到90%.

(5)物种检索工具

1)主要检索工具书

《中国淡水藻类—系统、分类及生态》科学出版社，2006;

《微型生物监测新技术》中国建筑工业出版社，1990;

《中国淡水藻志》科学出版社；

《淡水浮游生物图谱》农业出版社，1980;

《淡水微型生物图谱》化学工业出版社，2005;

《水和废水监测分析方法》（第三版）中国环境科学出版社，1989;

《中国动物志一节肢动物门甲壳纲淡水枝角类》蒋燮治；

《中国淡水轮虫志》王家揖主编；

《中国动物志一淡水挠足类》中国科学院动物研究所编著；

《原生动物学》沈锡芬主编。