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6.2 实验室使用商品化培养基和试剂的质量控制的测试方法
6.2.1 非选择性分离和计数固体培养基的半定量测试方法
6.2.1.1 平板的制备与保存
按照6.1.1.1中要求进行。
6.2.1.2 工作菌悬液的制备
将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜作为工作菌悬液。
6.2.1.3 接种
用1uL接种环进行平板划线(如图2)。A区用接种环按0.5cm的间隔划4条平行线,按同样的方法在B区和C区划线,最后在D区内划一条连续的曲线。同时接种两个平板,划线时可在培养基下面放一个模板图,并按标准规定的培养条件培养平板。
图2目标菌半定量划线法接种模式图
操作时用接种环而不用接种针,接种环应完全浸入培养基中。取一满环接种物,将接种环接触容器边缘3次可去除多余的液体。划线时,接种环与琼脂平面的角度应为20°~30°。接种环压在琼脂表面的压力和划线速度前后一致,整个划线应快速连续,移取液体培养物时应将接种环伸入培养液下部分以防止环上产生气泡或泡沫。
通常用同一个接种环对A~D区进行划线,操作过程不需要对接种环灭菌。但为了得到低生长指数G,在接种不同部分时应更换接种环或对其灭菌。
6.2.1.4 计算
培养后,评价菌落的形状、大小和生长密度,并计算生长指数G。每条有比较稠密菌落生长的划线则G为1,每个培养皿上G最大为16。如果仅一半的线有稠密菌落生长,则G为0.5。如果划线上没有菌落生长、生长量少于划线的一半或菌落生长微弱,则G为0。记录每个平板的得分总和便得到G。如,菌落在A区和B区全部生长,而在C区有一半线生长,则G为10。
6.2.1.5 结果解释
目标菌在培养基上应呈现典型的生长。目标菌的生长指数G大于或等于6时,培养基可以接受。非选择培养基的G值通常较高。
6.2.2 选择性分离和计数固体培养基的半定量测试方法
6.2.2.1 目标菌半定量测试方法
按照6.2.1中要求进行。
6.2.2.2 非目标菌(选择性)半定量测试方法
按照6.1.2.2中要求进行。
文章来源:《食品安全国家标准汇编检验方法(二)》
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