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HPLC仪器的关键核心部件的重要性(二)

发布时间:2018-06-29 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:1076

④光学系统。只要是用分光光度计(俗称光谱仪器)、光度计(不分光的光电比色仪器)组成HPLC系统,或只要是HPLC系统的光学类检测器,它们肯定要有光学系统。其中,单色器系统必不可少;即使非常简单的光电比色计,也要用滤光片来从复合光中得到单色光(单色纯度很差,光谱带宽很宽)。这块滤光片就可以认为是产生单色光的简单的单色器。一般稍微复杂一点的单色器,都由入射狭缝、出射狭缝、准直镜、光栅、物镜等元器件组成。从仪器学理论上讲,各种光吸收类的HPLC仪器的光学类检测器都是根据比尔定律设计的,而比尔定律研究的是在平行光、单色光的条件下,物质对光的吸收。但是,单色器(或滤光片)不可能得到真正的单色光,单色器系统不同,它产生的单色光的纯度(光谱带宽)也不同,并且光通过物质时也不可能是真正的平行光。因此,严格地说,实际工作中,任何光吸收类的光学类检测器,都不可能真正满足比尔定律。所以,专用光学检测器、分光光度计都是针对近似平行光、近似单色光的条件设计的。从理论上讲,其实际上并不能真正满足比尔定律的要求,会产生比尔定律的偏离,就会产生分析误差。所以,就看谁设计、制造的仪器最能满足或接近比尔定律(或产生的比尔定律的偏离最小),谁的仪器到了使用者手里,由于非平行光或非单色光产生的分析误差最小,谁的仪器就最好(当然还有杂散光、噪声、稳定性等要求)。这就是从仪器学理论去看分光光度计和HPLC仪器的光学类检测器的设计、制造误差的最根本、最本质的问题,也是使用者从仪器学理论去看分光光度计和HPLC仪器的光学类检测器的分析误差的最根本、最本质的问题。

⑤光电系统。只要是带有光学类检测器的HPLC仪器,它们肯定有光电转换系统,只是光电转换系统的类型不同、结构不同而已。例如,有的用光电管,有的用光电倍增管,有的用硅光电池,有的用二极管阵列或CCD等。因为,带有光学类检测器的HPLC,都必须要将光信号转换成电信号后,才能进行电学处理、进行计算、输出到打印机打印。所以,任何带有光学类检测器的HPLC仪器,不但都必须有相应的光电转换系统,而且这个系统中的光电元件本身的质量必须稳定可靠,必须有很高的光电转换效率(灵敏度),有相应的光谱响应范围,否则,就不可能保证HPLC仪器正常工作。同时,这些元件有的还必须加一个稳定的直流电源,以组成一个稳定的电光系统,才能保证仪器正常工作。例如,光电管必须加一个稳定的30~90V的直流电源,才能正常工作;光电倍增管必须加一个非常稳定的300~1000V的直流高压电源,才能保证仪器正常工作。如果光电元件本身不稳定或出了问题,不管其他部件多么好,仪器整机质量也肯定不好。如果发光元件很好,而电源不好,结果还是不好。例如:光电倍增管正常工作时,必须要加一个电压调整率优于0.05%的直流高压电源(微光测试的基本要求);一般的光电倍增管出厂检验测试时,都是加1000V的直流高压电源,这时,光电倍增管的电流放大倍数大约为106;科学实践表明:如果该电源电压波动率是1%,则光电倍增管的106倍的放大倍数就要波动12%左右,这是一个惊人的波动,将严重影响仪器整机的稳定性。由此可见,电光系统多么重要。

⑥电子学系统。任何HPLC仪器都有电子学系统(或放大器系统),如果电子学系统(放大器及其电源等)的噪声很大或漂移很大,整机的噪声或漂移就会很大。而噪声是各类HPLC仪器(特别是带有光吸收类检测器的仪器)的主要分析误差来源,是限制各类HPLC仪器整机的灵敏度的关键性的性能技术指标,是影响仪器整机可靠性的主要性能技术指标。我们平日所说的要求仪器“稳定可靠”,这是仪器设计、制造、使用者的宗旨。所以仪器如果不稳定,就谈不上可靠。因此,放大器系统的嗓声和漂移非常重要。

同时,因为一般来讲放大器的前面是光电系统,后面是模数变换器,而放大器和计算机之间的模数变换器(A/D变换器),一般要求前面放大器传输过来的电压为2V左右。但是光电转换电路传输过来的电压往往达不到要求,这就需要用放大器放大小信号,以满足A/D变换器的要求,而后A/D变换器才能将从放大器传输过来的模拟电信号变成数字信号,才能传输给计算机处理。因此,放大器和模数变换器的稳定性也是非常重要的。

目前,有些科技工作者盲目地说现代科学仪器大多采用的是数字电路,所以模拟电路不是很重要了,这种说法是不妥当的。因为,模拟电路在各类HPLC(包括GC仪器、各类光谱仪器)仪器中是非常重要的。没有模拟电路将前面的光信号转换成所需要的数字信号,后面的数字电路就不能起作用。一般来讲,HPLC仪器的准确度、噪声、漂移等主要性能技术指标都取决于模拟电路,所以电子学系统中的模拟电路部分是非常重要的。作者认为,从事各HPLC仪器设计、制造的科技工作者,一定要高度重视模拟电路的设计,否则就设计、制造不出优质HPLC仪器。

⑦计算机系统。它是现代科学仪器很重要的组成部分,它决定仪器的自动化程度,可以提高分析效率、保证仪器在最佳状态工作、保证避免人为操作误差、保证避免仪器带病工作、保证仪器安全运转等。计算机系统采用的计算方法的可靠性、准确性,最后将决定(或保证)分析数据的可靠性。

上述这七大关键核心部件(高压泵、色谱柱、电光系统、光学系统、光电系统、电子学系统、计算机系统)是决定HPLC仪器质量好坏的关键。特别是带有光学类检测器的仪器,只要这七大核心部件中有一个部件出现问题,整个HPLC系统将不能正常工作;只要有一个部件(包括零件)质量上出现问题,整台HPLC仪器质量就会有问题。这些问题会直接影响HPLC仪器整机系统的分析检测数据的误差,会使HPLC的使用者得不到满意的分析测试数据,而且这七个方面还互相关联、互相影响。所以,HPLC仪器的这七大关键核心部件非常重要。

作者通过长期实践,深深认识到:HPLC仪器的设计,必须既要把各个部件看成相关部分,又要把各个部件看成一个整体。所谓把各个部件看成相关的部分,就是在一台HPLC仪器上,把每个部件之间有什么联系,它的性能技术指标对它前面、后面的部件有什么影响,这些影响有多大,它对它前面和后面的部件有什么具体要求等,都要非常清楚,设计前都要用具体数据明确规定下来。例如,如果某个部件前面的部件输出参数(光学参数或电学参数)不能太小或太大,应该如何控制或处理(包括对前面、后面和该部件本身的处理),如何控制每个部件的输出的参数(压力参数、光学参数或电学参数)等,这些非常关键的重要问题设计时都必须用数字明确规定下来。

又例如,如果电光系统发出的光通量太小(灯泡功率太小),或电光学系统输出的光学信号太小,就会影响它后面光学系统接收到的光学信号大小,从而影响光学系统后面的光电系统。如果光电系统的光电转换器件用光电倍增管,就会因为电光系统的光信号太小而要加大光电倍增管的负高压。但是,加大光电倍增管的负高压,又会增大暗电流,使仪器整机的噪声增加。如果电光系统发出的光信号太小,引起光学系统的输出的光学信号太小,就会致使光电系统输出的信号变小,从而又要求电子学系统的放大倍数增大,结果又会增大放大器的噪声,从而影响整机的噪声和稳定性。

如果一台HPLC仪器的光电倍增管或硅光电池的光谱响应范围不够,就会严重影响仪器整机的适用性(光谱范围不能满足使用要求)。如果仪器光学系统的光栅的衍射效率太低,就会增加对前面电光系统的要求:一般都是要求电光系统发出较大的光通量。同时,如果仪器的光栅的衍射效率太低,对后面的光电系统要求会更高(光电倍增管或硅光电池的暗电流要小、光电倍增管电流放大倍数要大、光电倍增管负高压要高),会对后面部件的性能技术指标提高要求。同时,如果光栅的效率太低,还会影响放大器的性能技术指标,例如要求增大放大倍数、降低放大器的噪声等。所以,每个部件都始终互相影响、互相制约。

所谓把各个部件看成是HPLC系统整体的一部分,就是要根据仪器学理论,看各个部件之间的关系和部件对整机(或整机对各个部件)有什么要求,各个部件又如何影响整机、如何相互影响和制约。这些问题对设计者来讲是非常重要、必须在设计前搞清楚的问题,要求设计者用数字明确规定下来,写成可行性报告。同时,还要请有经验的专家对可行性报告进行论证,而后开始进行设计、试验。否则,就是随意的、漫无目标的设计,将会导致在研发过程中,开始发现不了问题,随着研发工作的深入,问题才逐步暴露,到后期,“节木”式的仪器已经搭出,但性能技术指标达不到要求,问题找不到,这时将导致整个设计失败。因此,作者认为设计必须根据仪器学理论进行,设计前一定既要把各个部件看成HPLC整体的一部分,又要把各个部件看成一个整体。如果一开始就不是根据仪器学理论设计,而是盲目地、随意地进行设计,就必然会失败。

作者通过实践认为,在对HPLC的高压泵、色谱柱、电光系统、光学系统、光电系统、电子学系统、计算机系统等关键、核心部件进行设计时,既要分别独立进行设计、试验,又要进行整体、全方位(全盘)的考虑;必须注意各个部件之间相互影响、相互制约、相互补充的关系。如果不懂仪器学,不从仪器学理论方面考虑问题,是不可能搞清楚这些问题的,也是不可能设计出优质HPLC仪器的。

相关链接:HPLC仪器的关键核心部件的重要性(一)

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