1 范围

本标准规定了动物组织中磺胺类抗生素残留的放射免疫受体筛选测定方法。

本标准适用于动物(牛、猪、家禽和鱼虾等)组织中磺胺类抗生素残留的放射免疫受体筛选测定。

2 试样制备和保存

2.1 试样制备

从混合原始样品中取出部分代表性样品，剔除脂肪组织后将可食部分放入搅拌器中绞碎，充分混匀，用四分法缩分出不少于500 g，均分两份，装入洁净容器内作为试样，加封并标明标记。

制样过程中必须防止样品受到微生物或化学物的污染或发生残留物含量的变化。

2.2 试样保存

样品于-18℃冷冻保存。新鲜或冷冻的组织样品可在2℃～6℃贮存72h。

3 测定方法

3.1 方法提要

样品中的磺胺类抗生素残留经提取、稀释后与[³H]标记的磺胺二甲基嘧啶相互竞争结合细菌细胞中的磺胺特异性受体。在一定温度下进行竞争性结合反应后，将磺胺-受体复合物的沉淀重新用水溶解，加入闪烁液后测定[³H]衰变发出的R粒子放射性计数cpm(count per minute)。液体闪烁计数仪测得的cpm与样品中磺胺残留量成反比。

3.2 试剂和材料

3.2.1 水，实验用水为重蒸馏水。

3.2.2 Charm Ⅱ竞争性受体结合组织磺胺测试试剂盒

每批新试剂盒使用前须进行性能监测。试剂盒主要由以下部分构成：

3.2.2.1 肉类组织阴性对照浓缩干粉，贮存于2℃～6℃。使用时取浓缩干粉按标签配制成组织阴性对照溶液，此溶液可在2℃～6℃冰箱或冰浴中保存48 h，或可将全部或部分溶液保存于-15℃以下的冰箱中，使用时将其置于室温下解冻，解冻后的溶液在2℃～6℃冰箱或冰浴中保存24 h。

3.2.2.2 多种抗生素混合标准品干粉，含磺胺二甲基嘧啶，贮存于2℃～6℃。使用时按标签配制成抗生素标准溶液，磺胺二甲基嘧啶浓度为1000 ug/L。溶液的保存方法同3. 2.2.1。

3.2.2.3 缓冲液：包括肉类组织提取缓冲溶液(MSU提取缓冲液)干粉和调节pH值的M₂缓冲液干粉，2℃～6℃贮存。使用时按标签配制成缓冲溶液，在2℃～6℃下可保存2个月。

3.2.2.4 磺胺受体：-18℃保存，应在包装盒所标明的有效期内。

3.2.2.5 磺胺氖标记物(³H-磺胺二甲基嘧啶=59 uCi/mmol): -18℃保存。³H-磺胺二甲嘧啶的非特异性结合率不应超过³H-磺胺二甲嘧啶液体闪烁总计数的20％，否则应更换。

3.2.3 正己烷。分析纯。

3.2.4 闪烁液。

3.3 仪器和设备

3.3.1 液体闪烁计数仪：仪器运行时，环境温度20℃～27℃，相对湿度30％～70% (20℃)，仪器使用地点远离其他放射源。

3.3.2 高速组织捣碎分散匀质器。

3.3.3 离心机，最大转速为4 000 r/min。

3.3.4 电热恒温器。

3.3.5 带适配器的硅硼酸盐玻璃试管。

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文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

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