1 范围

SN/T 1777的本部分规定了动物源性食品中螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、泰乐菌素、红霉素、罗红霉素、交沙霉素液相色谱串联质谱测定方法。

本部分适用于猪肉、禽肉、肝脏、肾脏和蜂蜜中七种大环内酯类抗生素残留量的检测。

2 测定方法

2.1 方法提要

用乙腈提取样品中大环内酯类抗生素，正己烷脱脂，C₁₈固相萃取小柱净化，液相色谱串联质谱测定，外标法定量。

2.2 试剂和材料

除另有规定外。所有试剂均为分析纯，水为二次蒸溜水。

2.2.1 乙腈：高效液相色谱级。

2.2.2 正己烷：高效液相色谱级。

2.2.3 甲醇：高效液相色谱级。

2.2.4 甲酸：高效液相色谱级。

2.2.5 氯化钠。

2.2.0 氢氧化钠。

2.2.7 磷酸二氢钠。

2.2.8 乙腈饱和正己烷。

2.2.90.1 mol/L氢氧化钠：称取4g氢氧化钠，并用水稀释至1 L。

2.2.10 甲醇：水(2:8，体积比)。

2.2.11 无水硫酸钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。

2.2.12 磷酸盐缓冲溶液：溶解13.8g磷酸二氢钠于950 mL水中，用0.1 mol/L氢氧化钠溶液调节溶液pH值到8.0，最后用水稀释至1。

2.2.13 螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素磷酸盐、泰乐菌素酒石酸盐、红霉素、罗红霉素、交沙霉素标准品：纯度大于等于95％。

2.2.14 七种大环内酯标准储备溶液：分别称取0.0100g标准品(2.2.13)，分别用甲醇溶解定容至100 mL，溶液浓度为100 ug/mL，1℃～4℃冰箱保存。临用前根据需要用甲醇稀释至适当浓度，作为混合标准工作液，1℃～4℃冰箱保存。
2.2.15 标准工作曲线工作液：准确移取0.10mL七种大环内酯混合标准溶液，浓度分别为20 ng/mL，40 ng/mL，200 ng/mL，400 ng/mL，500 ng/mL，再加相应基质空白溶液0.9 mL，混匀，相当于样品中含有10 ug/kg，20 ug/kg，100 ug/kg，200 ug/kg，250 ug/kg大环内酯。

2.3 仪器和设备

2.3.1 高效液相色谱-质谱质谱仪：配有电喷雾离子源。

2.3.2 旋转蒸发器。

2.3.3 固相萃取装置。

2.3.4 离心机。

2.3.5 均质器。

2.3.6 旋涡混合器。

2.3.7 pH计。

2.3.8 固相萃取小柱：C₁₈固相萃取小柱，500 mg，或相当者。5 mL甲醇，5 mL水预洗。

2.3.9 无水硫酸钠柱：80 mm×40 mm(内径)筒形漏斗，底部垫5 mm脱脂棉，再装50 mm无水硫酸钠。

2.4 测定步骤

2.4.1 样品制备

a)猪肉、禽肉、肝脏、肾脏：从所取全部样品中取出有代表性样品约500 g，用组织捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于-18℃以下冷冻存放。

b)蜂蜜：取500 g代表性蜂蜜样品，未结晶的样品将其用力搅拌均匀，有结晶析出的样品可将样品瓶盖塞紧后，置于不超过60℃的水浴中温热，等样品全部熔化后搅匀，迅速冷却至室温。在熔化时应注意防止水分挥发。制备好的试样均分成两份，分别装入样品瓶中，密封，并标明标记，于常温下存放。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。

2.4.2 提取

a)猪肉、禽肉、肝脏、肾脏样品：称取5g试样(精确到0.01g)置于50 mL具塞离心管中，加25 mL乙腈，在均质器中以12000r/min均质30 s，于3000r/min离心3 min，将上层乙腈提取液过滤，收集于50 mL容量瓶中．在样品残渣中再加20 mL乙腈，重复．上述操作，合并乙腈提取液，加乙腈定容至50 mL。

b)蜂蜜样品：称取2g试样(精确到0.01g)置于50 mL具塞离心管中，加15 mL磷酸盐缓冲溶液(2.2.12)溶解,混匀。

2.4.3 净化

a)猪肉、禽肉、肝脏、肾脏样品：移取20 mL乙腈提取液于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈饱和的正己烷于旋涡混合器上以2000r/min，混匀1 min，以3000r/min离心3 min，弃去上层正己烷溶液，再加入20 mL乙腈饱和的正己烷(2.2.8)，重复上述操作，将乙腈层过无水硫酸钠柱，在50℃以下水浴减压浓缩至干，用15 mL磷酸盐缓冲溶液(2.2.12)分三次溶解残渣，将溶解液转移至固相萃取小柱中(2.3.8)，再用5 mL水和5 mL甲醇水溶液(2.2.10)依次洗涤浓缩瓶，洗涤液过固相萃取小柱，弃去流出液，负压抽干，用6 mL甲醇洗脱，控制流速3 mL/min，收集全部洗脱液于10 mL离心管中，用水定容至10.0mL，供液相色谱-串联质谱仪测定。如果溶液混浊，用3 mL正己烷净化。

b)蜂蜜样品：将提取液直接转移至固相萃取小柱中(2.3.8)，按上述方法操作。

文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。