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1 范围
本标准规定了动物源性食品中链霉素、双氢链霉素、庆大霉素、新霉素、卡那霉素、安普霉素、巴龙霉素等氨基糖苷类药物残留测定的制样和放射免疫受体分析法。
本标准适用于猪肉、牛肉、鸡肉、鱼肉中链霉素、双氢链霉素、庆大霉素、新霉素、卡那霉素、安普霉素、巴龙霉素等氨基糖苷类药物残留测定的放射受体筛选分析法。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法
3 试样制备与保存
从混合原始样品中取出部分代表性样品,剔除脂肪组织后将可食部分取有代表性样品约500 g,用组织绞碎机绞碎混匀,均分成两份,分别装入洁净容器中,密封,并标明标记,于-18℃以下冷冻保存。制样过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
4 方法提要
检测的基础是竞争性受体免疫反应。样品中的氨基糖苷类药物残留经提取、稀释后与[3H]标记的氨基糖苷类药物相互竞争结合位点,样品中的氨基糖苷类药物含量越高,竞争结合的位点越多,[3H]标记的氨基糖苷类结合的位点则越少。用液体闪烁计数仪测定[3H]衰变发出的β粒子放射性计数cpm(count per minute,即每分钟脉冲数)值,该值与样品中氨基糖苷类残留量成反比。
5 试剂和材料
除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
5.1 组织中庆大霉素-新霉素族测试试剂盒
每批新试剂盒使用前须进行性能监测。试剂盒主要由以下部分构成:
1) Ag萃取缓冲液:加入1000 mL水溶解瓶中物质,此溶液可在2℃~6℃保存2个月;
2) MSU多抗生素标准品:加入10.0 mL水溶解,庆大霉素浓度为5000 ug/L,此溶液可在2℃~6℃保存48 h;或将该溶液保存于-15℃以下,使用时将其解冻,解冻后的溶液在2℃~6℃保存24 h;
3)庆大霉素-新霉素族受体药片:白色药片,-15℃以下保存,应在包装盒所标明的有效期内;
4)庆大霉素-新霉素族氖标记药片:黄色药片,-15℃以下保存,应在包装盒所标明的有效期内。
5.2 组织中链霉素族测试试剂盒
每批新试剂盒使用前须进行性能监测。试剂盒主要由以下部分构成:
1)阴性对照浓缩干粉:加入10 mL水溶解,此溶液可在2℃~6℃保存48 h;或将溶液保存于-15℃以下,使用时将其解冻,解冻后的溶液在2℃~6℃保存24 h;
2)MSU多抗生素标准品:加入10 mL水溶解,临用前配制,链霉素浓度10 000 ug/L,溶液的保存方法同5.2.1);
3)MSU萃取缓冲液:加入1 000 mL水溶解,在2℃~6℃可贮存2个月;
4)M2缓冲液:加入50 mL水溶解,在2℃~6℃可贮存2个月;
5)链霉素族受体药片:白色药片,-15℃以下保存,应在包装盒所标明的有效期内;
6)链霉素氘标记物药片:绿色药片,-15℃以下保存,应在包装盒所标明的有效期内。
5.3 氢氧化钠。
5.4 盐酸。
5.5 0.1 mol/L氢氧化钠溶液:称取4g氢氧化钠(5.3),溶于1000 mL水。
5.6 0.1 mol/L盐酸:量取9 mL盐酸(5.4),缓慢地加入400 mL~600 mL水中,混匀后用水定容至1 000 mL。
5.7 闪烁液:Optifluor闪烁液或相当者。
6 仪器和设备
6.1 Charm Ⅱ7600分析仪。
6.2 分析天平:感量0.01g。
6.3pH计:测量精度±0.1。
6.4 恒温加热器:80℃±2℃, 35℃±1℃。
6.5 高速组织捣碎分散匀质器。
6.6 离心机。
6.7 涡旋混匀器。
6.8 药片压杆。
6.9 具塞硅硼酸盐玻璃试管:8 mL。
文章来源:《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》
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