9 原理

将试样用混合酸消化，使硒化合物氧化为无机硒Se⁴⁺,在酸性条件下Se⁴⁺与2,3-二氨基萘(2,3-Diaminonaphthalene,缩写为DAN)反应生成4,5-苯并苤硒脑(4,5-Benzo piaselenol),然后用环己烷萃取。在激发光波长为376nm,发射光波长为520nm条件下测定荧光强度，从而计算出试样中硒的含量。

10 试剂和材料

除非另有规定，本方法所使用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。

10.1 硒标准溶液：准确称取元素硒(光谱纯)100.0mg,溶于少量浓硝酸中，加入2mL高氯酸(70%～72%),至沸水浴中加热3h～4h,冷却后加入8.4mL HCl(盐酸浓度为0.1mol/L)。再置沸水浴中煮2min。准确稀释至1000mL,此为储备液(Se含量：100ug/mL)。使用时用0.1mol/L盐酸将储备液稀释至每毫升含0.05ug硒。于冰箱内保存，两年内有效。

10.2 DAN试剂(1.0g/L):此试剂在暗室内配制。称取DAN(纯度95%～98%)200mg于一带盖锥形瓶中，加入0.1mol/L盐酸200mL,振摇约15min使其全部溶解。加入约40mL环己烷，继续振荡5min。将此液倒入塞有玻璃棉(或脱脂棉)的分液漏斗中，待分层后滤去环己烷层，收集DAN溶液层，反复用环己烷纯化直至环己烷中荧光降至最低时为止(纯化5~6次)。将纯化后的DAN溶液储于棕色瓶中，加入约1cm厚的环己烷覆盖表层，至冰箱内保存。必要时在使用前再以环己烷纯化一次。

警告：此试剂有一定毒性，使用本试剂的人员应有正规实验室工作经验。使用者有责任釆取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关规定的条例。

10.3 混合酸：将硝酸及高氯酸按9+1体积混合。

10.4 去硒硫酸：取浓硫酸200mL缓慢倒入200mL水中，再加入48%氢溴酸30mL,混匀，至沙浴上加热至出现白浓烟，此时体积应为200mL。

10.5 EDTA混合液

10.5.1 EDTA溶液(0.2mol/L):称取EDTA二钠盐37g,加水并加热至完全溶解，冷却后稀释至500mL；

10.5.2 盐酸羟胺溶液(100g/L):称取10g盐酸羟胺溶于水中，稀释至100mL；

10.5.3 甲酚红指示剂(0.2g/L):称取甲酚红50mg溶于少量水中，加氨水(1+1)1滴，待完全溶解后加水稀释至250mL。

10.5.4 取EDTA溶液(10.5.1)及盐酸羟胺溶液(10.5.2)各50mL,加甲酚红指示剂(10.5.3)5mL,用水稀释至1L,混匀。

10.6 氨水(1+1)。

10.7 盐酸。

10.8 环己烷：需先测试有无荧光杂质，否则重蒸后使用，用过的环己烷可回收，重蒸后再使用。

10.9 盐酸(1+9)。

11 仪器和设备

11.1 荧光分光光度计。

11.2 天平：感量为1mg。

11.3 烘箱。

11.4 粉碎机。

11.5 电热板。

11.6 水浴锅。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（一）》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。