5.4 微量浓缩与溶剂交换

5.4.1 提取物的溶剂交换

5.4.1.1 将浓缩的提取液转移到带聚四氟乙烯硅胶垫的棕色螺口瓶中，置于氮气浓缩器下吹氮浓缩(可在45℃的控温条件下进行)。

注：气流过大会引起样品损失，氮气流速调节到能够使溶剂表面轻微振动。

5.4.1.2 如果需要称重，有必要将提取物用氮气吹至恒重。

5.4.1.3 如果属于提取液净化溶剂更换，按以下步骤操作：

a)如果采用凝胶色谱系统(GPC)净化，需在凝胶色谱系统(GPC)进样前用二氯甲烷将提取液体积调至5.0mL。如果用HPLC净化，则需在HPLC进样前将提取液浓缩至1.0mL。

b)如果用层析柱(硅胶、活性炭或弗罗里土)进行净化，则需将提取物溶剂转换成正已烷，并定容至1.0mL。

5.4.2净化后的微量浓缩与溶剂交换

如果提取液浓缩后用于HRGC/HRMS分析，则将净化分离后得到的各流分分别用旋转蒸发仪浓缩至3mL～5mL,再在氮气下浓缩至1mL～2mL,然后在氮气流下定量转移至装有0.2mL的锥形衬管的进样瓶中，并用正已烷洗涤浓缩蒸镏瓶，一并转入锥形衬管中。待浓缩至约100uL,分别加入适量PCDDs/Fs和DL-PCBs回收率内标溶液，壬烷(可用辛烷代替)定容。继续在细小的氮气流下浓缩至溶剂只含壬烷或辛烷。样品溶液的最终体积可根据情况调整，大约为20uL。将进样瓶密封，并标记样品编号。室温下暗处保存，供HRGC/HRMS分析用。如果样品当日不进行HRGC/HRMS分析，则于＜-10℃下保存。

PCDD/Fs和DL-PCBs的分析流程图可参见附录D的图D.2。

6 PCDD/Fs色质分析

6.1 HRGC/HRMS条件

6.1.1 GC的色谱条件

推荐筛选色谱柱为DB-5ms柱或等效柱，柱长60m、内径0.25mm、液膜厚度0.25um；对于2,3,7,8-TCDF的确证推荐使用DB-235ms柱或等效柱，柱长30m、内径0.25mm,液膜厚度0.25um；也可以使用RTX-2330或等效柱，柱长50m～60m、内径0.25mm、液膜厚度0.20um。

注：为了得到最佳的分离度和灵敏度，需要优化GC色谱条件，且优化后，标准溶液、空白、IPR及OPR检查和样品检测都应釆用相同的GC条件。

采用DB-5ms色谱柱或等效柱的推荐条件：

a)进样口温度：280℃；

b)传输线温度：310℃；

c)柱温：120℃(保持lmin)；以43℃/min升温速率升至220℃(保持15min)；以2.3℃/min升温速率升至250℃,以0.9℃/min升温速率升至260℃,以20℃/min升温速率升至310℃(保持9min)；

d)载气：恒流，0.8mL/min。

釆用RTX-2330色谱柱或等效柱的推荐条件(供选择使用)：

a)进样口温度：280℃；

b)传输线温度：260℃；

c)柱温：90℃(保持1.5min)；以25℃/min升温速率升至180℃；再以2℃/min升温速率升至260℃(保持30min)；

d)载气：恒流，1mL/min。

6.1.2 质谱参数

6.1.2.1 分辨率：在分辨率≥10000的条件下，进样PCDD/Fs单标或目标化合物与相邻组分没有干扰的混标溶液。

6.1.2.2质量校正：PCDD/Fs分析的运行时间可能超过质谱仪的质量稳定期。这是由于质谱仪在高分辨模式下运行时，百万分之几的质量数偏移(如百万分之五质量数)可能对仪器的性能产生严重影响，为此，需要对偏移的质量进行校正。可以采用参考气(全氟煤油，PFK；或全氟三丁胺，FC43)的质量数锁定进行质量偏移校正。分析过程中调节进入HRMS中参考气的量，要求监测的锁定质量数信号强度不得超过检测器满量程的10%。

注：过量的参考气可能引起噪声且增加对离子源的污染，导致清洗离子源的频率增加。

6.1.2.3选择一个参考气离子碎片，如接近m/z304(TCDF)的m/z304.9824(PFK)信号，调整质谱以满足最小所需的10000分辨率(10%峰谷分离)。

6.1.2.4在给定的GC条件下，进样luL或2uL CSl校正溶液,考察离子丰度比、最小水平、信噪比及绝对保留时间：

a)测定各目标化合物峰面积，对质谱仪的分辨率进行确认；

b)各窗口有必要进行连续监测，确保在GC运行中能够监测全部PCDD/Fs。如果仅测定2,3,7,8，-TCDD和2,3,7,8-TCDF,则将窗口修改为包括四氯和五氯异构体、二苯醚和锁定质量数；

c)HRGC/HRMS应满足最低检测限要求，进样CS1时PCDD/Fs和标记化合物的信噪比应大于10:1；

d)¹³C₁₂-1,2,3,4-TCDD在DB-5柱上的绝对保留时间应大于25.0min。

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文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（一）》

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