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20世纪90年代以后,HPLC成为β-内酰胺类药物残留检测中应用最广泛的方法。由于β-内酰胺类药物在结构上都含有羧酸基团,早期采用离子交换色谱(一般选用阴离子交换柱)来分离测定。对于两性离子型化合物,在流动相中添加离子对试剂来调节容量因子,改善分离效果,即侧链含酸性基团的加酸抑制剂并加碱性反离子;侧链含碱性基团的,加有机胺类化合物或选择含胺的缓冲溶液,或选择低pH的乙酸缓冲溶液。
08-2021
LC-MS是目前残留分析中最重要的分离分析方法之一。作为-种高灵敏度和高选择性的检测技术,可用于目标化合物确证。并随着仪器不断改进,其检出限也越来越低,提供的碎片信息更可靠,广泛应用于食品安全残留检测。而液相色谱-四极杆串联质谱技术(LC-MS/MS)目前已成为β-内酰胺药物残留确证分析最常用的手段。
IA是以抗原与抗体的特异性、可逆性结合反应为基础的分析技术,具有单独一种理化分析技术难以达到的选择性和灵敏度,非常适用于复杂基质中痕量组分的分离或检测。与常规理化分析技术相比,IA法具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、成本低、安全可靠等优点,成为临床、生物医药、环境化学以及兽药残留分析中一种有力的分析手段。
适用于牛、羊、猪和鸡肉中9种青霉素残留量的液相色谱串联质谱法测定。方法检出限:萘夫西林为0.25μg/kg;青霉素G为0.5μg/kg;哌拉西林、青霉素V、苯唑西林为1.0μg/kg;阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、双氯西林为2.0μg/kg。
用9种青霉素标准储备溶液配成的基质混合标准溶液分别进样,以标准工作溶液浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准工作曲线。用标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中9种青霉素的响应值均应在仪器测定的线性范围内。
在本方法的研究中,用OasisHLB固相萃取柱、BUNDELUT C18固相萃取柱、ENVI-18固相萃取柱、Octadecyl C18固相萃取柱、LiChrolutEN固相萃取柱和Sep-Pak C18固相萃取柱共六种固相萃取柱对9种青霉素的提取效率和净化效果进行了比较。
采用注射泵直接进样方式,以5μL/min分别将阿莫西林、氨苄西林、哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、氯唑西林、萘夫西林、双氯西林标准溶液注入离子源,用正离子检测方式对9种青霉素进行一级质谱分析(Q1扫描),得到质子化分子离子峰分别为366、350、518、335、351、402、436、415和470,再对分子离子进行二级质谱分析(子离子扫描),得到碎片离子信息。
用不含青霉素的样品进行添加回收率和精密度实验,样品中添加0.25~20μg/kg(1 LOD~10 LOD)四个不同水平的9种青霉素标准后,摇匀,使标准物与样品充分吸收,然后按本方法进行提取和净化,用高效液相色谱-串联质谱仪测定。
采用本方法对羊肉、猪肉、牛肉、鸡肉,在0.25~20μg/kg(LOD~10 LOD)四个不同水平的9种青霉素进行添加回收率实验,检查方法的适用性。
牛奶和奶粉中阿莫西林、氨苄西林、哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、氯唑西林、萘夫西林和双氯西林残留,用乙腈-水溶液提取,固相萃取柱净化,高效液相色谱-串联质谱测定,外标法定量。
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