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试样中的抗生素用磷酸溶液提取,三氯乙酸沉淀蛋白,用苯磺酸型和羧酸型固相萃取柱净化。液相色谱-串联质谱仪(ESI+)检测,外标法定量。
08-2021
实验样品混合均匀,分出0.5kg作为试样。试样置于-18℃冰柜,避光保存。
外标法定量:在仪器最佳工作条件下,对链霉素、双氢链霉素和卡那霉素的混合基质标准校准溶液进样测定,以混合基质标准校准溶液浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准工作曲线,用标准工作曲线对待测样品进行定量,样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。
实验表明,样品中的蛋白质对质谱测定的影响较大,有效地除去测定溶液中的蛋白质是样品提取和净化的关键所在。
取链霉素、双氢链霉素和卡那霉素标准10μg/mL,以10uL/min流速该标准溶液注入离子源,找到定性、定量离子对,同时对去簇电压(DP)、聚焦电压(FP)、碰撞气能量(CE)及碰撞室出口电压(CXP)等参数进行优化,使各种参数达到最佳。
牛奶样中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素添加为10.0μg/kg,奶粉样中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素添加为80.0ug/kg时,其信噪比均大于10,获得较好的回收率及精密度,由此确定牛奶中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素的检出限均为10.0ug/kg,奶粉中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素的检出限均为80.0μg/kg
在重复性试验条件下,获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限(r),如果差值超过重复性限(r),应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。在再现性试验条件下,获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限(R)。
适用于蜂蜜中16种磺胺残留量液相色谱-串联质谱测定。方法检出限:磺胺甲噻二唑为1.0ug/kg;磺胺醋酰、磺胺嘧啶、磺胺吡啶、磺胺二甲基异噁唑、磺胺甲基嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺甲基异噁唑为2.0μg/kg;磺胺噻唑,磺胺甲氧哒嗪、磺胺间二甲氧嘧啶为4.0ug/kg;磺胺甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶为8.0ug/kg;磺胺苯吡唑为12.0ug/kg。
用混合标准工作溶液分别进样,以峰面积为纵坐标,工作溶液浓度(ng/mL)为横坐标,绘制标准工作曲线,用标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中16种磺胺的响应值均应在仪器测定的线性范围内。
用不含磺胺类药物的蜂蜜样品进行添加回收率和精密度实验,样品添加不同浓度标准后,摇匀,放置1h,使标准被样品充分吸收,然后按本方法进行提取和净化,用液相色谱-串联四极杆质谱测定。
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