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MSPD 是一种快速样品处理技术。其基本操作是把样品直接与适量的反相键合硅胶一起混合研磨,使样品被均匀分散于固定相颗粒表面制成半固态,装入层析柱中,然后采用类似SPE的操作进行洗涤和洗脱。MSPD技术使用样品量少,要求检测方法具有较高的灵敏度。
08-2021
β-内酰胺环母体的紫外检测波长在200~235nm之间,紫外吸收缺乏特征性,干扰组分影响较大,因此应用液相色谱检测时往往需要衍生化,使其具有特征吸收。衍生化分为柱前和柱后两种。
CAPs残留分析的测定方法主要有微生物法、免疫分析法、薄层色谱法、毛细管电泳法、色谱及色质联用法等。基于抗原抗体特异性反应建立起来的免疫学测定方法具有灵敏度较高、特异性强、预处理简单、分析时间短等优点,目前已经研制出一些成熟的试剂盒产品,使用方便,有着广阔的应用前景色谱方法可检出样品中痕量的残留药物,具有检测限低、精确度高等特点:而色质谱联用技术更是目前唯一有效的确证手段,但是存在着操作复杂、时间长、成本较高的问题。
基于抗原与抗体特异性反应的免疫分析技术,一直是兽药残留快速检测和样品筛选方法的研究热点。CAPs的二氯酰胺醇和硝基苯结构与大分子蛋白结合后可作为完全抗原,并有效制备相应的抗体。从20世纪80年代后期开始,免疫法在众多的CAPs残留检测方法中发展迅速。
RIA技术是使用以放射性同位素(如125I、32P、3H等)作标记的抗原或抗体,利用同位素标记的抗原和未标记的抗原与抗体发生竞争抑制反应,用γ射线探测仪或液体闪烁计数器测定γ射线或β射线的放射性强度,来测定抗体或抗原含量的技术。
免疫传感器就是利用抗原(抗体)对抗体(抗原)的识别功能而研制成的生物传感器。作为一种新兴的生物传感器中,免疫传感器以其鉴定物质的高度特异性、敏感性和稳定受到青睐,它的问世使传统的免疫分析发生了很大的变化。免疫传感器主要包括表面等离子体共振(SPR)和电化学免疫传感器(ECIS)等。
胶体金是由氯金酸在还原剂如柠檬酸三钠、白磷、枸橼酸钠、鞣酸等的作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,在静电作用下形成的一种稳定的胶体状态。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团牢固结合。由于这种结合是静电结合,所以胶体金能稳定、迅速地吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显改变,不影响蛋白质的生物学特性。
TLC将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。Dreassi等报道了采用平面色谱(PC)测定牛血浆中TAP含量的方法。
CAPs分子结构中含有一个不游离的氨,为中等极性化合物,可用反相液相色谱法(RP-LC)进行分离。非极性烷基键合相是目前应用最广泛的柱填料,其中十八烷基硅烷键合相在RP-LC分析中发挥着主要作用,一般采用C18分析柱,少数用C18柱或苯基柱。
GC具有高分离效能、高选择性、高灵敏度等特点。由于CAPs分子中含有羟基、氯基、亚氨基,分子极性较大,挥发性和热稳定性差,须对它们的极性官能团进行酯化、硅烷化或酰化,生成热稳定和易挥发的衍生物,才能使用GC进行测定。
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