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在本方法的研究中,根据河豚鱼和鳗鱼样品的特点和被测物的性质,利用乙腈具有脱蛋白质的作用,采用乙腈作为提取液,消除基质对9种青霉素的干扰。分别完成河豚鱼、鳗鱼中9种青霉素用乙腈提取回收率实验。
08-2021
配制含哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、萘夫西林浓度分别为1.25~100ng/mL(0.5~40LOD);阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、双氯西林浓度分别为2.5~200ng/mL(0.5~40LOD)的样品基质混合标准溶液,在选定的条件下进行测定,进样量为20uL,用峰面积对标准溶液中各被测组分的浓度作图,哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、萘夫西林的绝对量分别在0.025~2ng范围。
蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧萘青霉素、苯唑青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残留,用去离子水溶解后,溶液用OasisHLB或相当的固相萃取柱净化,液相色谱-串联质谱仪测定,外标法定量。
在仪器最佳工作条件下,用青霉素G、青霉素V、乙氧萘青霉素、苯唑青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素标准储备溶液配成的基质混合标准溶液分别进样,以标准工作溶液浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准工作曲线。用标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中青霉素G、青霉素V、乙氧萘青霉素、苯唑青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素的响应值均应在仪器测定的线性范围内。
分别用去离子水、4%氯化钠溶液和0.1 mol/L磷酸二氢钠缓冲溶液(pH 9.0)作为提取液,完成蜂蜜样品中6种青霉素回收率实验。
用不含青霉素的蜂蜜样品进行添加回收率和精密度实验,样品中添加不同浓度标准后,摇匀,使标准物与样品充分吸收,然后按本方法进行提取和净化,用高效液相色谱-串联质谱仪测定。
采用本方法对葵花蜜、荞麦蜜、棉花蜜、油菜蜜和梧桐蜜等11个不同蜜种,在2.0μg/kg,10ug/kg,20ug/kg,40ug/kg四个添加水平对6种青霉素进行添加回收率实验。
蜂蜜中头孢唑啉、头孢匹林、头孢氨苄、头孢洛宁、头孢喹肟残留,用磷酸二氢钠缓冲溶液提取,固相萃取柱净化,液相色谱-串联质谱仪测定,外标法定量。
β-内酰胺类药物的残留检测方法已有大量报道,主要有微生物检测法、免疫检测法、色谱法以及色质联用法,而色谱法主要包括液相色谱法(LC)、气相色谱法(GC)和薄层色谱法(TLC)等。免疫检测法的优点在于费用相对较低,便于使用,方便携带,适合现场开展工作,具有高选择性和灵敏度,具有很大的发展前景;而微生物法和理化检测法则较为成熟。
20世纪90年代以后,HPLC成为β-内酰胺类药物残留检测中应用最广泛的方法。由于β-内酰胺类药物在结构上都含有羧酸基团,早期采用离子交换色谱(一般选用阴离子交换柱)来分离测定。对于两性离子型化合物,在流动相中添加离子对试剂来调节容量因子,改善分离效果,即侧链含酸性基团的加酸抑制剂并加碱性反离子;侧链含碱性基团的,加有机胺类化合物或选择含胺的缓冲溶液,或选择低pH的乙酸缓冲溶液。
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