随着时间的流逝和科学技术的发展，今天色谱技术已经在各个领域被广泛应用。特别是在中西药研究开发、各类复杂体系、各类药品生产的检验、生命科学、有机化学、食品科学、农业科学、疾控、环保等各个领域使用都非常广泛。

由于HPLC具有高分辨率、高分离效果、高灵敏度等优点，所以其应用发展非常神速；目前，几乎所有需要分离的化学工作，它都可以发挥其优势。特别是，在很多科研院所的研发工作和日常分析工作中，往往一种技术解决不了的问题，用几种技术联用就会迎刃而解，就会出现一大片分析领域的新天地。而HPLC能够很灵活地与各类分析仪器配套联用，形成其他分析仪器无法比拟的优点；利用它的优异分离能力和多种洗脱方式，可以对各种试样进行分析。所以，目前与HPLC相关的联用技术发展很快，特别是目前应用很多的高端联用仪器。例如，HPLC-MS、HPLC-MS-MS、HPLC-AAS、HPLC-AFP等。可以预言，HPLC仪器的应用，将在“农、轻、重，海、陆、空，吃、穿、用”等各个领域无所不在、无所不有。

HPLC在食品分析检测中的应用发展很快。目前，对食品营养成分分析检测，如对食品中的蛋白质、氨基酸、糖类、维生素、香料、有机酸(邻苯二甲酸、柠檬酸、苹果酸等)、有机胺、矿物质等都可以使用HPLC进行分析检测；特别在食品安全检测方面，HPLC使用更加广泛；食品中各种添加剂(为改善食品品质和色、香、味以及防腐、保鲜和加工工艺的需要而加入食品的人工合成或者天然物质)的检测；例如甜味剂(食品中糖精钠、甜味素、甜蜜素、安赛蜜、甘草苷、甜菊苷等)、防腐剂、着色剂(如合成色素—柠檬黄、苋菜红、新红、胭脂红、日落黄、赤藓红、亮蓝等)、抗氧化剂(没食子酸丙酯，又称棓酸丙酯、二丁基羟基甲苯，又称2,6-二叔丁基对甲苯酚、丁基羟基茴香醚，又称叔丁基-4-羟基茴香醚等)、增白剂(过氧化苯甲酰、亚硫酸盐)、咖啡因、苏丹红等的检测工作，基本上都是采用HPLC仪器。

还有，对霉菌毒素、黄曲霉毒素、黄杆菌毒素、大肠杆菌毒素、牛奶中的三聚氰胺等的检测；加工过程中的监控，例如，对丙烯酰胺，具有潜在的神经毒性、遗传毒性和致癌性物质的监测控制；贮藏过程中的监控，例如，对微生物及其代谢物、黄曲霉毒素等的检测；肉制品的监测控制，例如，对腌腊肉制品、含硝酸盐和亚硝酸盐，容易进一步生成N-亚硝胺(N-亚硝基二甲胺，N-亚硝基二乙胺，N-亚硝基四氢吡咯)的易导致患肝癌、结肠癌等的制品的监控也都用HPLC。

此外，药品GMP认证、保健食品GMP认证、食品GMP认证、食品HACCP认证工作等都离不开HPLC；它是食品工业、食品卫生检测与监督等实验室不可缺少的分析仪器。

HPLC在环境分析中的应用：

水及废水中酚类化合物的分析检测，一般采用HPLC-UVD；水及废水中苯胺类化合物的分析检测，一般采用HPLC-UVD；废水中阿特拉津(除草剂)的分析检测，一般采用HPLC-UVD；空气中的苯胺类化合物的分析检测，一般采用H PLC-UVD等。

中国的《空气和废气监测分析方法》《水和废水监测分析方法》等标准中，目前规定必须要采用HPLC仪器检测。
HPLC在农业中的应用：

农药残留量分析检测：多种有机磷农药，如敌百虫、乙基对氧磷、氨基甲酸酯类农药都要求采用RHPLC分析检测；高毒性农药(有机磷、氯)、低毒性农药、苯甲酰脲类农药(如除虫脲、氟铃脲、氟苯脲)等的检测大多用HPLC检测；低毒农药具有高效、分解快、选择性强、残留期短等特点，所以应该引起重视。

食品和饲料中硝基呋喃的药物分析检测：呋喃唑酮(痢特灵)、呋喃西林、呋喃妥因RHPLC，广泛应用于痢特灵残留量分析。内脏、饲料中苯乙胺类(PEAS)药物的分析检测，例如盐酸克伦特罗的分析检测等。

我国农业部颁发强制性行业标准《饲料中盐酸克伦特罗的测定》(2006年5月1日开始执行)，要求采用HPLC-UVD或GC-MS检测。

HPLC在生命科学中的应用：

低分子量物质分析检测：如氨基酸、有机酸、有机胺、类固醇、卟啉、糖类、维生素等的分离和测定。

高分子．物质分析检测：如多肽、核糖核酸、蛋白质和酶(各种胰岛素、激素、细胞色素、干扰素等)的纯化、分离和测定。特别是多肽和核糖核酸的分析检测，国内外基本上都采用HPLC法进行。因为多肽大多数的吸收峰都在紫外区，所以大多采用紫外检测器分析检测；核糖核酸的研究工作中，因为有些核苷有紫外吸收，有的没有紫外吸收，有的发天然荧光，有的不发天然荧光，所以分析检测过程中，国外有些科技工作者采用HPLC的紫外检测器和荧光检测器串联进行。中国科学院上海有机所的研究人员，由作者自己研发成功UV/FL-1型紫外荧光检测器，它是一种一机两用的HPLC检测器，只需要8uL样品，可以同时得到有紫外吸收、发天然荧光、没有紫外吸收但是加衍生物后发荧光和有紫外吸收又有天然荧光的核苷。

HPLC在医学检验中的应用：体液中代谢物测定；药代动力学研究；临床药物监测、尸胺、腐胺、亚精胺、组胺等有害毒素的检测等，都规定用HPLC仪器进行。

HPLC在中国各版药典中的应用(品种)逐年增加，说明HPLC在制药行业的应用发展很快。我国五年一版的药典中，规定用HPLC检测的药品品种增长情况如图1-10所示。该图中没有2010年版的药品品种数据，但是2010年版中药品品种的增长幅度很大，增长的绝对数量很大(已增加到2000多种)。例如，采用HPLC方法检测的药品(有关物质)的增加项目，由2005年版的142种增加到707种；含量测定的药品采用HPLC法检测的品种，由2005年版的359种增加到694种。

图1-10 HPLC在药典中应用的品种增长情况

《中国药典》(2005年版)收载的乳糖酸红霉素中有关物质的检查采用TLC法，操作复杂，重现性差，2010年版改用HPLC法，同时可以准确定量红霉素A、B、C组分及其有关物质，有效解决了TLC定量困难的问题。

《中国药典)))(2010年版)含量测定采用HPLC的标准中，比2005年版增加了335个，其中大部分是反相色谱，也有吸附色谱、离子交换色谱等。《美国药典》第19版(1975年)首次收载HPLC作为法定分析方法时只有6个品种，第20版收载了80个，第21版增至418个，第22版增至1441个，现在收载的品种超过2000个。

《中国药典》(1995年版)收载的诺氟沙星胶囊的含量测定用非水滴定法，检验中发现，用该方法检验合格的样品，用HPLC法复检时含量仅为20％～30％，经调查系造假所致，所以自2000年版以后，改用HPLC法，杜绝了该违法行为。