由于质谱为精密度很高的仪器，易受实验环境、溶剂、样品纯度等因素的影响，因此在实际使用过程中，应注意诸多事项，才能获得理想的实验结果。

一、LC的流速设定

使用ESI离子源时，液相色谱的最佳流速为1～50ul/min，若应用4.6mm内径色谱柱时要求柱后分流，TIS源最高允许1ml/min，建议200～400ul/min。APCI的最佳流速为1ml/min，适合使用直径4.6mm的常规柱。

二、LC的流动相限制

LC-MS接口避免进入不挥发的缓冲液，避免含磷和氯的缓冲液，含有钠和钾的组分应<1mmol/L；含甲酸(或乙酸)＜2%，含三氟乙酸≤0.5%，含三乙胺<1%。含醋酸铵<5～10mmol/L。进行HPLC-MS分析前一定要确定好HPLC条件，保证组分能够基本分离，并且缓冲体系符合MS要求。

三、UV与ＭS串联分析

LC/MS分析时的液相条件，大多数情况下与常规的液相分析条件不一致，为了便于对不同色谱条件下的色谱峰进行关联，可将MS与UV检测器进行串联，在用质谱对相应组分进行结构分析后，采用UV的色谱相关光谱法对不同色谱系统下的组分进行相互关联。为了提高分析效率，常采用柱长小于100mm的短柱(此时UV图上并不能获得完全分离)。

四、样品的预处理

为了防止固体小颗粒堵塞进样管道和喷嘴，保护仪器，并获取最佳分析结果，在进行LC/MS分析之间，需要对待测样品进行预处理。常用的处理方法包括超滤法、溶剂萃取法、固相萃取法、色谱分离法等。

五、LC-MS中常见的本底离子

在进行HPLC-MS分析时，质谱图中会重复出现一些离子，这些离子并非来源于待测样品，而是由溶剂和仪器等产生的，在质谱分析时，需加以鉴别和排除。下面列举了部分常见的本底离子。

m/z15-150，溶剂离子，[(H₂O)_nH⁺，n=3-112]

m/z102，H+乙腈+乙酸，C₄H₇NO₂H⁺，102.0549

m/z149，管路中邻苯二甲酸酯的酸酐C₈H₄O₃H⁺，149.0233

m/z288，2mm离心管的产生的特征离子

m/z279，管路中邻苯二甲酸二丁酯C₁₆H₂₂O₄H⁺，279.1591

m/z316，2mm离心管的产生的特征离子

m/z384，瓶的光稳定剂产生的离子

m/z391，管路中邻苯二甲酸二辛酯，C₂₄H₃₈O₄H⁺，391.2843

m/z538，乙酸+氧+铁(喷雾管)，Fe₃O(O₂CCH₃)₆，537.8793

六、分子量测定失败的原因分析

LC-MS分析能够获取样品的许多多结构信息，其中分子量是最基本和最主要的结构信息。试验中有时会发现无法获取待测组分的分子量，部分可能的原因如下：①流动相不合适；②不挥发性盐的影响；③成分复杂，杂质太多；④样品浓度不够；⑤pH不合适；⑥样品在离源内分解或碎裂。

相关链接：液相色谱-质谱联用法在实际应用中的注意事项

文章来源：《实用中药药品检验检测技术指南》

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