(1)原理 某些细菌可以产生溶血酶，使红细胞破裂，血红蛋白逸出，称红细胞溶解，简称溶血。溶血性细菌，如某些溶血性链球菌和产气荚膜杆菌可导致败血症，疟原虫破坏红细胞和某些溶血性蛇毒含卵磷脂酶，使血浆或红细胞的卵磷脂转变为溶血卵磷脂，使红细胞膜分解。
菌落周围形成狭窄的草绿色溶血环，叫做甲型（α）溶血；形成透明溶血环，叫做乙型（β）溶血；无溶血作用的也叫γ溶血。

(2）培养基 血琼脂培养基。

(3）试验方法 用接种环取出液体培养基（肉汤）中待检菌液一环，在血平板上划线接种，经37℃培养15-18h，观察到菌落周围溶血环产生情况。

注：最好选择培养15一18h的幼龄菌接种，因处于幼龄状态的细菌代谢活跃，溶血效果好。

(4）结果 菌落周围形成溶血环为阳性反应（＋）；否则为阴性反应（－）。

(5）应用

①链球菌可以产生α溶血和β溶血两种现象。

②金黄色葡萄球菌和蜡样芽抱杆菌群溶血试验阳性，菌落周围呈现β型完全溶血的溶血环。

③单核细胞增生李斯特氏菌在血平板培养后可产生窄小的β—溶血环。

④需要注意的是加葡萄糖的血平板会使有些菌的溶血性发生变化，如A型和某些B型链球菌在加有葡萄糖的血平板上呈。型溶血，而在不加葡萄糖的血平板上呈β型溶血。