(1)原理 有的细菌产生卵磷脂酶，可迅速将卵黄中的卵磷脂分解为磷酸胆碱等极性基团部分和不溶于水的甘油醋，菌落产生乳光，菌落周围出现乳白色沉淀，如产气荚膜梭菌。

有的细菌产生脂肪酶进一步将甘油酩分解为水溶性的脂肪酸和甘油，脂肪酸遇钙、镁等离子沉淀，平板上出现白色浑浊环，如金黄色葡萄球菌。当用接种针触及菌落时具有黄油样黏稠感。有时浑浊带环是多重酶参与下形成的。有的在菌落表面出现虹彩样或珍珠层样（长脂肪链膜造成）。凡出现透明圈，或浑浊沉淀，或虹彩样，或珍珠层样（如G型以外的肉毒羧菌、A型诺氏索菌、生孢梭菌）的均为卵黄反应阳性。

(2)培养基 卵黄胰陈液或卵黄琼脂平板。

(3）试验方法

①将测试菌的菌液一环接在有卵黄的卵黄胰陈液试管和不加卵黄的对照管中，适温培养1d,3d或5d观察。

②将测试菌点接在卵黄琼脂平板上，每皿可分散点接4-5株菌（芽抱杆菌以点接1-2株菌为宜）以不影响结果观察为度，如测试厌氧菌，则须在上面加盖无菌的盖玻片。每株菌至少重复点接两皿。35℃培养1-2d观察。

(4）结果 假若与对照管相比较，在卵黄胰胨液中或表面，形成白色沉淀者，或在卵黄琼脂平板菌落周围形成乳白色浑浊环则为阳性反应（＋）。

(5）应用 主要用于厌氧菌的鉴定。产气荚膜梭菌、诺维梭菌产生此酶，其他梭菌为阴性。