氯化三苯四氮唑法

    氯化三苯四氮唑(triphenyltetrazolium chloride，TTC)法是依据抗生素残留对微生物新陈代谢的影响而设计的。这是目前我国食品卫生标准中规定的检测牛乳中抗生素残留的方法。该方法以嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)为指示菌，TTC为指示剂(TTC的氧化态无色，还原态为红色)。当食品中没有抗生素残留的存在时，样品提取液不影响指示菌的新陈代谢，从而能使无色氧化态的TTC还原为红色还原态的TTC，培养液从无色变为红色；相反，当食品中有抗生素残留的存在时，则其提取液抑制指示菌的新陈代谢，培养液不发生颜色变化。这样，培养液颜色不变的为阳性，变为红色的为阴性。该方法检测青霉素、链霉素、庆大霉素和卡那霉素的检测限分别为O．004IU／mL、O．5IU／mL、0．4IU／mL和5IU／mL。

    微生物受体检测法    

    微生物受体检测法(microbial receptor assay，MRA)是根据微生物细胞上存在抗生素的受体位点(如微生物细胞表面的某种酶)而设计的。这些受体位点通常可以和一类抗生素的共有结构(如p内酰胺类抗生素的β一内酰胺环)进行特异性结合。在检测过程中，以同位素、胶体金或酶标记的抗生素为竞争物与样品或样品提取液中的抗生素残留竞争受体位点，当样品中抗生素残留量少时，则微生物细胞受体位点上结合的标记抗生素就多，反之，细胞结合位点上结合的标记抗生素就少，这样通过测定微生物细胞上标记抗生素的多少就可以计算出样品中抗生素的残留龟。

    在抗生素残留检测中应用的MRA产品主要是美国CHARM Science公司研制生产的检测氯霉素残留的试剂盒CHARMⅡ。在检测时，将抗体溶于水后，加入含氯霉素的样品中，在一定的孵育温度下，样品中的氯霉素与受体位点结合，再加入同位素标记的氯霉素抗原与多余的受体位点结合，孵育一段时间后离心沉淀，取沉淀物加闪烁液，用闪烁计数仪(CHARMⅡ分析仪)测定荧光强度，样品中氯霉素残留量与荧光强度成反比。该方法对于鱼组织中氯霉素残留量的检出限可达O．15μg／妇，但存在假阳性的问题。

    从总体上讲，微生物检测方法在抗生素残留检测中一般用于样品筛选，检测成本低廉，操作简便，不需要昂贵的仪器设备，非常适合基层单位使用。