薄层色谱是一种微量、快速和简单的色谱方法。它可用于分离混合物，鉴定和精制化合物，是近代有机分析化学中用于定性和定量的一种重要手段。它兼有柱色谱和纸色谱的优点，它展开时间短，分离效率高（可达到300一4000块理论塔板数），需要样品少（数微克）。如果把吸附层加厚，试样点成一条线时，又可用作制备色谱，用以精制样品。薄层色谱特别适用于挥发性小的化合物，以及那些在高温下易发生变化、不宜用气相色谱分析的化合物。

薄层色谱的原理和柱色谱类同，属于固--液吸附色谱。样品在涂于玻璃板上的吸附剂（固定相）和溶剂（移动相）之间进行分离。常用的吸附剂是硅胶和氧化铝。各种化合物的吸附能力各不相同，在展开剂上移时，它们进行不同程度的解吸，从而达到分离的目的。如果采用硅藻土和纤维素为支撑剂，则其原理为分配色谱。

薄层色谱的操作方法（如点样、展开、显色等）都和纸色谱基本相同。显色剂除能使用纸色谱的显色剂外，还可采用腐蚀性的显色剂，如浓硫酸、浓盐酸等。斑点位置亦以比移值表示。

(1)吸附剂

薄层色谱的吸附剂最常用的是硅胶和氧化铝，其颗粒大小一般为260目以上。颗粒太大，展开时溶剂移动速度快，分离效果不好；反之，颗粒太小，溶剂移动太慢，斑点不集中，效果也不理想。

国产硅胶有：硅胶G(含有煅石膏作黏合剂）、硅胶H(不含煅石膏，使用时需加入少量聚乙烯醇、淀粉等作黏合剂）和硅胶F₂₅₄（含有荧光物质），后者使用之后可在紫外光下观察，有机化合物在亮的荧光板上呈暗色斑点。硅胶常用于湿法铺层。

(2)铺层

实验室常用20cmx5cm、20cmx10cm,20cmx20cm的玻璃板来铺层。玻璃板要预先洗净擦干。铺层分湿法和干法两种。

湿法铺层：先将吸附剂调成糊状，例如，称取硅胶G20一50g，放入研钵中，加入水40一50ml，调成糊状。此糊大约可涂5cmx20cm的板20块左右，涂层厚0.25mm。注意，硅胶G糊易凝结，所以必须现用现配，不宜久放。

为了得到厚度均匀的涂层，可以用涂布器铺层。将洗净的玻璃板在涂布器中间摆好，夹紧，在涂布槽中倒入糊状物，将涂布器自左至右迅速推进，糊状物就均匀涂于玻璃板上（图2.34)。如果没有涂布器也可以进行手工涂布。将调好的糊状物倒在玻璃板上，用手摇晃，使其表面均匀光滑，但这样涂的板厚度不易控制。

干法铺层：氧化铝可用于干法铺层。最简单的办法是取平整干净的玻璃板一块，水平放置，在玻璃板上撒上一层氧化铝。另取一根直径均匀的玻璃棒，其两端绕上几圈胶布，将棒压在玻璃板上，用手自一端推向另一端，氧化铝就在板的表面形成一层薄层（图2.35)。

(3）活化

涂好的薄层板在室温晾干后，置于烘箱内加热活化。当温度到达100℃后，硅胶板在105一110℃保持30min。氧化铝板一般在135℃活化4h。活化之后的板应放在干燥箱内保存。如果薄层吸附了空气中的水分，板就会失去活性，影响分离效果。硅胶板的活性可以用二甲氨基偶氮苯、靛酚蓝和苏丹红三个染料的氯仿溶液，以己烷：乙酸乙酯=9:1为展开剂进行测定。

(4）展开

薄层色谱的展开需要在密闭的容器中进行。将选择好的展开剂放入展开缸中，使缸内空气先饱和几分钟，再将点好试样的板放入。干板宜用近水平式的方法展开（图2.37)，板的倾斜度以不影响板面吸附剂的厚度为原则，倾角一般为-10⁰-20⁰。湿板通常都含有黏合剂，所以可用直立式的方法展开（图2.36)。

薄层色谱展开剂的选择也要根据样品的极性、溶解度和吸附剂活性等因素来考虑，绝大多数采用有机溶剂。
由于薄层色谱操作简便，经常用来为柱色谱和高速液相色谱寻找试验条件（如展开剂）。